1. 細菌濃懸液用鹽水經2500轉/分，20分鐘離心洗滌一次。
2. 將沉淀的菌混勻于蒸餾水中，放66℃水浴，然后滴加等量的90%熱酚溶液（預熱至66℃），邊加邊搖，而后在66℃水浴中攪拌25分鐘
3. 在水浴中冷卻，于4℃冰箱過夜
4. 以2000轉/分離心15分鐘
5. 將上層水溶液吸到另一試管中
6. 剩下的酚層及殘渣組分可再加上述同量水在熱水浴中攪拌30分鐘，冷卻，離心，取上層水溶液。將兩次提的水溶液混合，置透析袋中于生理鹽水中透析2天，其間換幾次鹽水，以除去酚。
7. 透析后的水溶液層經濃縮（如用聚乙二醇在透析袋外層涂抹以除去水分）。即成粗制脂多糖，于冰箱內保存備用。
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