薄層層析的定量測定：
1）直接測定法：色譜分離后，直接用肉眼觀察比較或用儀器掃描斑點而測定其含量。
a.目測法樣品經色譜分離后，直接觀察所得斑點的大小和顏色的深淺，并與標準品在相同條件下展開所得到的一系列已知不同濃度的標準斑點相比較，而近似地判斷樣品中所測成分的含量。
b.測面積法展開后色譜上的斑點面積與化合物含量間，符合一定的線性關系。
c.儀器測定法：用光密度計或稱薄層掃描儀（TLC Scanner）掃描定量，該方法已成為薄層定量的主要方法。主要包括：吸收測定法，熒光測定法，熒光淬滅法。
2）洗脫測定法：
（1）斑點的定位
（2）斑點的洗脫:用吸集器將斑點位置的吸附吸下，然后用洗脫溶劑洗脫。
（3）測定：
a.紫外分光光度法：洗脫液調整至一定體積，在此化合物最大吸收波長處測定。同時把樣品斑點相應位置薄層吸附劑同樣取下做空白對照。
b.比色法：選擇靈敏度高、專屬性好的比色反應測定化合物含量，是比較常用的方法。
c.其它方法：極譜、庫侖滴定、熒光測定等。