薯蕷皂苷元的提取和鑒別_溶解性差異法

目的要求：

1．掌握甾體皂苷元（親脂性和中性成分）的提取方法。

2．熟悉薯蕷皂苷元的性質及鑒定法。

簡介：

薯蕷皂苷元（Diosgenin）是一種甾體皂苷元，分子式（C₂₇H₄₂O₃₁）,分子量414.61，為白色結晶，mp204～207℃，[ ]25D-129.3（CHCl₃），溶于一般有機溶劑和醋酸，不溶于水。目前，是制造多種甾體藥物如口服避孕藥（I號，II號避孕藥片）和甾體激素（如可的松）等的重要原料。

在植物界主要分布在薯蕷科薯蕷屬（Dioscorea）植物中，我國的薯蕷屬植物有80余種，其中只有薯蕷根莖組（Stenophora）的17種、I亞種及一變種才含有甾體皂苷元，其它則含有多量淀粉，無皂苷元。已用于生產的主要有盾葉薯蕷（D.Zingiberensis C. H. Wright），穿龍薯蕷（D.nipponica Makino），黃山藥（D.panthaica prain et Burkil）,紫黃姜(D.nipponica Makinovar rosthani prain et Burk)等。

在植物體內薯蕷皂苷元是與葡萄糖、鼠李糖結合成薯蕷皂苷（Dioscin）而存在。提取分離時，一般是先用稀酸將薯蕷皂苷水解成薯蕷皂苷元與單糖（葡萄糖、鼠李糖）。因薯蕷皂苷元不溶于水，混存于植物殘渣中，故可用有機溶劑（如石油醚）直接從植物殘渣中提取出薯蕷皂苷元。

提取方法：

1．皂苷預試：

2．薯蕷皂苷元的提取：

注一：檢查薯蕷皂苷元是否提盡，可用李伯曼反應，參考實驗二“注三”項下。

注二：回收石油醚的方法見實驗一“注四”項下。

注三：所得薯蕷皂苷元（粗品）用石油醚抽洗后，即可測定熔點，若熔點不合格時，才進行重結晶。

薯蕷皂苷元的鑒定：

1．熔點測定：204～209℃

2．薄層層析鑒定：

應只呈現一個與標準Rf值一致的色斑。

樣品：白色結晶的無水醇液

標準品：薯蕷皂苷元無水醇液

1）吸附劑：AI₂O₃軟板（中性100～200目，活性Ⅲ級）

展開劑：苯一甲醇（9：1）

2）吸附劑：硅膠H-CMC硬板

展開劑：石油醚-乙酸乙酯（7：3）

顯色劑：10%磷鉬酸乙醇溶液。噴霧后加熱10～20分鐘

3）化學反應：

①Liebermann-Burchard反應

②CHCI₃-濃H₂SO₄試驗

③五氯化銻反應（Kahlenberg反應）：與五氯化銻的氯仿溶液呈紫藍色。

4）制備衍生物：

乙酰化物的制法：取樣品100mg溶于3ml吡啶中，加入20ml醋酐，煮沸半小時至一小時后，將反應物倒入冰水中（冬季操作使用冷水即可）。待析出白色晶體后，抽濾，析出物丙酮重結晶即得。mp196～193℃。

5）紫外吸收光譜的測定：

取樣品5mg，加入濃H₂SO₄ 10ml，在40℃水浴上加熱1小時，放冷，測定。薯蕷皂苷元應有以下最大吸收峰：

λmax 271nm 415nm 514nm

10gε 3.99 4.06 3.6