1. 如灌制均一濃度凝膠一樣在多板凝膠灌制裝置中組裝好微型膠夾層。 2. 如圖一、安裝好30 ml 梯度發生器、磁力攪拌器、蠕動泵（可選用）和聚乙烯Tygon管，梯度發生器的輸出端連接于制膠室下方的輸入口。 
圖一
3. 配制丙烯酰胺輕溶液和重溶液，省略脫氣步驟，在使用前才加入過硫酸銨，如制作5片0.75 mm 厚的微型膠，兩種液體各需約12 ml。在用前重溶液應置于冰上。
4. 在輸出閥和連通閥關閉時，往貯液室加入重溶液，稍打開連通閥，讓小量重溶液通過其流到混合室，排出閥中的空氣。 5. 往混合室中加入輕溶液。按每12 ml 液體4 μl 的量往各室中加入TEMED。用一次性吸管加以混和。 6. 打開磁力攪拌器，開啟連通閥，然后慢慢打開輸出閥，讓溶液在重力的作用下從梯度發生器流出進入制膠室，流速調整在3~4 ml/min。
7. 當所有濃度梯度液體流出混合室后，空氣要進人輸出管前，關閉輸出閥，往兩液室加入封堵液后，再慢慢開啟閥門。
8. 讓在制膠室的丙烯酰胺液體在封堵液的推動下向上流,進入平板夾層，當封堵液將到達玻璃平板的底部時，關閉閥門。
9. 往每片凝膠夾層中快速地加入100 μl 水飽和異丁醇，讓凝膠靜置聚合1 h。
10. 配制和灌制積層膠。 11. 撤去與梯度犮生器的連接后，將制膠裝置放在一個洗滌池中，卸下前面板，從底部排出封堵液，取出凝膠。 展開 | 