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  • 實驗材料

    蛋白質

    試劑、試劑盒

    乙醇

    儀器、耗材

    電泳儀墊片樣品梳

    實驗步驟

    1.  用水性實驗室去污劑徹底洗擦制膠用玻璃平板,接著用熱水、去離子水、95%乙酵依次沖洗,晾干。

     

    2.  用粘膠棒在玻璃平板的底部邊緣擦上一道粘痕,快速地將Gel Bond 膠片以疏水面向下放在平板上,隔著kimswipe紙巾用力壓,使之固定在平板上,從Gel Bond 背面的頂部將膠片掀起,往其下的玻璃面滴上幾滴水,放下膠片,用油墨滾筒將之推平。

     

    3.  按廠商的指南組裝凝膠夾層。在組裝前,用氣體吹去Gel Bond 表面及與其相對的玻璃平板表面的如灰塵等物質。

     

    4.  配制和灌制分離膠和積層膠,樣品梳用剪切得大小合適的供序列膠用梳子代替。積層膠在室溫聚合30~45 min。

    5.  制備樣品和加樣。

     

    6.  電泳,每片凝膠在7 mA(膠厚0.25 mm)或14 mA(膠厚0.5 mm)恒流下電泳4~5 h。

    7.  分離完成后,取出凝膠,染色前需在水流下冼去膠板上的粘性物。

    展開


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