蛋白質、多肽液相色譜純化方法介紹（三）

2、純化前的準備工作

（1）樣品穩定性試驗

a、測定樣品在pH2-9的穩定性；

b、測定樣品在0-4mol/LNaCl及0-2mol/L硫酸銨中的穩定性；

c、測定樣品在0-50%乙醇、甲醇中的穩定性；

d、測定樣品在4-40℃的穩定性；

e、室溫下靜置過夜，測定對蛋白水解酶的穩定性。

（2）樣品預處理

a、去除樣品中顆粒物（0.45-0.22微米膜過濾或者10000g離心15分鐘）

b、去除樣品中脂類（10000g離心15分鐘或有機溶劑抽提）

c、去除樣品中核酸（加入核酸酶消化或者使核酸沉淀）

d、抑制樣品中蛋白水解酶（加入蛋白酶抑制劑、低溫下快速第一步分離或在蛋白酶缺陷宿主中表達重組蛋白）

（3）樣品的保存條件：

短期儲存（小于24小時）

a、避免接近或超過樣品的穩定極限防止蛋白質變性或沉淀

b、在密閉容器中冰箱冷藏

較長期儲存（數天）

a、b、同上

c、加入適當的抑菌劑

長期儲存

a、同上

b、冰凍或者最好凍干（真空冷凍干燥）保存。