盡管大多數分泌蛋白是共翻譯易位的，但有些分泌蛋白在胞質溶膠中翻譯，然后通過翻譯后系統轉運到ER/質膜。在原核生物中，這一過程需要某些輔助因子，例如SecA和SecB，并由Sec62和Sec63（兩種膜結合蛋白）促進。嵌入ER膜中的Sec63復合物導致ATP水解，使伴侶蛋白與暴露的肽鏈結合，并將多肽滑入ER腔。一旦進入管腔，多肽鏈就可以正確折疊。該過程僅發生在位于胞質溶膠中的未折疊蛋白質中。
此外，針對其他細胞目的地的蛋白質，如線粒體、葉綠體或過氧化物酶體，使用專門的翻譯后途徑。靶向核的蛋白質也通過添加核定位信號(NLS)進行翻譯后易位，該信號促進通過核孔穿過核膜。