1. 將凝膠置于玻璃或聚乙烯容器中，加入100 ml 固定液，在旋轉搖床中緩慢搖動30 min。 2. 傾去固定液，將凝膠浸沒在脫色液中，緩慢搖動30 min。 3. 傾去脫色液，加50 ml 10%戊二醛，在通風櫥中緩慢搖動10 min。 4. 傾去戊二醛，用水徹底洗凝膠2 h，期間換水幾次以保證獲得低本底水平。
5. 傾去水，以100 ml ug/ml 的DTT浸泡凝膠30 min。 6. 傾去DTT溶液，不用沖洗，直接加入100 ml 0.1%硝酸銀溶液，緩慢搖動30 min。
7. 傾去硝酸銀溶液，用小量水快速冼凝膠1次，然后用小量碳酸鹽顯影液快速洗2次。
8. 將凝膠浸泡在100 ml 碳酸鹽顯影液中緩慢搖動，直至獲得所需的顯色水平。
9. 每100 ml 碳酸鹽顯影液中加入2 ml 2.3mol/l 檸檬酸，并緩慢搖動10 min 以終止染色。 10. 傾去液體，用水冼幾次，緩慢搖動30 min。 11. 凝膠拍照，凝膠在0.03%碳酸鈉中浸泡10 min，用塑料保鮮膜包裹或密封于可熱密封的袋子中保存。 展開 | 