1.切下二維凝膠目的蛋白點，每個點分別放置于 10 ml 的聚丙烯管，用 9 ml 水重新水化。 注意不要將這些蛋白點搞混。從不同的凝膠上獲得的相同的蛋白點可以在一個聚丙烯管中處理。
2.用 9 ml 水洗滌重新水化的膠塊，共洗 5 次，每一次約 5 min。 3.棄去最后一次洗滌的水，加人平衡緩沖液以浸沒膠塊，室溫下平衡膠塊 lh。 4.向巴氏滴管末端滴人 5% 的瓊脂糖溶液，放置片刻使其凝固。然后向巴氏滴管中滴加濃縮膠。 5.通過管式凝膠接合器將滴管嵌人 Protean Ⅱ xi2-D 電泳槽，每一塊凝膠上加 0.5 ml 的水。 6.使凝膠聚合 [凝膠的詳細情況，見圖 6.19(a)]。棄去滴管頂端的水，加人平衡的凝膠點和平衡緩沖液（從步驟3制得）[見圖 6.19(b)]，凝膠塊和平衡緩沖液總體積不得超過 0.5 ml。剩下的滴管體積用聚丙烯酰胺凝膠電泳緩沖液充滿。 7.室溫下在 Protean Ⅱ xi2-D 電泳槽中以 250V 電壓電泳，直至染料到達滴管末端。 8.停止電泳。以一個 2 ml 的注射器在滴管末端施加溫和的壓力，將濃縮了的凝膠自滴管取出。 9.將濃縮了的凝膠放入裝有 30 ml 考馬斯亮藍染色液的 50mi 試管中，室溫下染色 10?20 min。 10.以脫色液脫色。
 11.將切下染色的蛋白質條帶做進一步鑒定。例如，進行內部序列分析（見第 7 章），或電印跡到 PVDF 膜以后直接進行 Edman 降解（見方案 2)。 展開 | 