蛋白質糖基化的檢測實驗——植物凝集素親和層析

TBS

植物凝集素柱

1. 在含有 Ca²⁺、Mg²⁺ 的 TBS 中平衡植物凝集素親和介質，用至少 20 個柱體積清洗。

2. 在 5 ml —次性塑料吸管或注射器中制備 1 ml 植物凝集素柱。

3. 以緩慢流速（小于 0.25 ml/min）將蛋白樣本上柱，回收所有過柱子的流過液。

4. 用 TBS 開始洗柱子，對于 1 ml 柱床體積的柱子，以 1 ml 1份收集流出液， 共收集 10 個 1 ml 流分。

5. 用溶解在 TBS 中的半抗原開始洗脫，對 10 個柱體積來講，收集 1 個柱體積 1 份的流出液。

6. 如果必要，在 SDS-PAGE 電泳和檢測前，用 TCA/DOC 沉淀來濃縮蛋白。