血凝儀原理概述

　　止血與血栓分子標志物的檢測指標與臨床各種疾患有著密切聯系，如動脈粥樣硬化，心腦血管疾病、糖尿病、動靜脈血栓形成，血栓閉塞性脈管炎、肺栓塞、妊娠高血壓綜合癥、彌散性血管內凝血、溶血尿毒綜合癥、慢性阻塞性肺炎等。中醫藥關于活血化瘀的理論與治療工作研究也都涉及止血與血栓問題。為使臨床準確運用這些指標進行診斷，衛生部印發了《關于出凝血時間檢驗方法操作規程》，對活化部分凝血活酶時間（APTT）和血漿凝血活酶時間（PT）等操作方法進行了詳細規范。因此使用血液凝固分析儀（以下簡稱血凝儀）對血栓和止血進行實驗室檢查成為必要。血凝儀分為全自動與半自動兩類。為結合在省內大多數醫院的實際需要，本文僅涉及半自動血凝儀工作原理并對德國BE公司的半自動血凝儀做簡要介紹。

　　目前國內外各生產廠家生產的半自動血凝儀都是基于凝固法對血液凝固過程進行測量的。血液凝固是一系列凝血因子連鎖性酶反應的結果。血液中的凝血因子以無活性酶原形式存在，當某一凝血因子被激活后，可使許多凝血因子按一定的次序先后被激活，彼此之間有復雜的催化作用，被稱為“瀑布樣學說”。這種“瀑布樣學說”產生的激變在血液的生物物理特性上表現為，電阻增大（電流法）粘度增強（磁珠法），濁度上升（光學法）。由于電流法測量可靠性差，因此為磁珠法和光學法所替代。

　1、光學法（比濁法）

光學法血凝儀是根據血漿凝固過程中濁度的變化來測定凝血功能。根據儀器不同的光學測量原理，又可分為散射比濁法和透射比濁法兩類。

　　（1）散射比濁法：散射比濁法是根據待驗樣品在凝固過程中散射光的變化來確定檢測終點的。在該方法中檢測通道的單色光源與光探測器呈90O直角，當向樣品中加入凝血激活劑后，隨樣品中纖維蛋白凝塊的形成過程，樣品的散射光強度逐步增加。當樣品完全凝固以后，散射光的強度不再變化，通常是把凝固的起始點作為0%，凝固終點作為100%，把50%作為凝固時間。光探測器接收這一光學的變化，將其轉化為電信號，經過放大再被傳送到監測器上進行處理，描出凝固曲線。

　　（2）透射比濁法：透射比濁法，是根據待測樣品在凝固過程中吸光度變化來確定凝固終點的、與散射比濁法不同的是該方法的光路同一般的比色法一樣呈直線安排：來自光源的光線經過處理后變成平行光，透過待測樣品后照射到光電管變成電信號，經過放大后監測處理。當向樣品中加入凝血激活劑后，開始的吸光度非常弱，隨著反應管中纖維蛋白凝塊的形成，標本吸光度也逐漸增強，當凝塊完全形成后，吸光度趨于恒定。血凝儀可以自動描繪吸光度的變化曲線并設定其中某一點對應的時間為凝固時間。

　2、磁珠法

磁珠法是根據血漿凝固過程中粘度的變化來測量凝血功能的。根據儀器對磁珠運動測量原理的不同，又可分為光電探測法和電磁珠探測法。

　　（1）光電探測法：在磁珠法中光電探測器的作用與光學法中不同，它只測量血漿凝固過程中磁珠的運動規律，與血漿的濁度無關。在磁珠法中的一對電磁鐵安放在測試杯的兩端，它們產生恒定的交替磁場使磁珠在測試杯中擺動，在與磁珠擺動的垂直方向安放一對光電接收裝置，當磁珠擺幅衰減到50%時確定凝固終點。

　　光電探測法中還有一種利用紅外光反射監測器監測磁珠運動的，下面介紹BE系列半自動血凝儀中將另加介紹。

　　（2）電磁探測法：電磁探測法又可稱為雙磁路磁珠法，其中一對磁路用于吸引磁珠擺動，另一對磁路利用磁珠擺動過程中對磁力線的切割所產生的電信號，對磁珠擺動幅讀度進行監控，當磁珠擺動幅度衰減到50%確定凝固終點。

　　光學法和磁珠法用于血凝檢測，就方法論而言各有千秋，光學法的優點在于結構簡單、靈敏度高。易于自動化等。缺點在于易受特異血漿干擾，對此各廠家已采取不同措施予以彌補。磁路法優點不受特異血漿的干擾，試劑量少，缺點，磁珠的質量、杯壁的光滑程度等，均會對測量結果造成影響。一些廠家為推銷自身產品在方法論上大做文章，片片面強調某種方法的優越性是不足取的。其一目前各國生產的血凝儀兩類方法并存，且光學法占據主導地位，在全自動血凝儀中尤其如此。其二判斷儀器的優劣有多種方面包括方法、設計、工藝等。

　　下面將簡要介紹德國BE公司及其所生產的半自動血凝儀系列。

　　BE公司是以研究開發與生產制造血凝分析產品為主和專業性高科技公司，公司擁有多項凝血分析的ZL技術和數十年制造經驗。其生產質量體系獲得國際IS9001質量認證和歐洲CETUU認證。其在國內推出的TRT系列（光學法）和CL系列（磁珠法）分有單、雙、四通道不同規格，可滿足各類醫院的不同需求，現對兩種系列分別介紹如下：

　　一、TRT系列

　　該系列儀器有單、雙、四通道三個品種，儀器采用光學比濁測試方法。儀器工作特點：

　1、該系列儀器測量過程中也需加入 磁珠，磁珠的作用：

　　（1）、將血漿和試劑充分混勻。

　　（2）、由于攪拌過程中磁珠對纖維蛋白原的纏繞使得液體逐漸變清，吸光度減少，人為增大了血漿凝固前后吸光度的差值，從而有效抑制了低纖維蛋白原、黃疸、高血脂等特異血漿對光學測量過程的干擾。

　2、采用普通加樣器，加樣后計時自動開始。

　3、僅用3個鍵盤，操作快捷。

　　該儀器配備有四個試劑溫育位，兩套樣品溫育位。

　　二、CL系列

　　該系列有雙、四通道兩個品種，儀器采用磁珠法，測試原理如下：測試杯中放有磁珠。測試時，測試杯下面的永久磁鐵旋轉，帶動杯中磁珠沿杯壁旋轉。測試杯的側壁外安裝有紅外反射式光電器件監視磁珠運動變化。根據運動力學原理當血漿粘度增大后，旋轉的磁珠將向杯中心靠攏，光電器件檢測不到磁珠時測量結束。

　　該儀器工作特點：

　　1、不受特異血漿干擾；

　　2、所用試劑可比光學法減半；

　　3、可對纖溶進行測量。

　　兩系列儀器均可與計算機聯網，并配有操作方便的中文操作系統。

　　以上所述僅對半自動血凝儀的工作原理作一粗略介紹，希望能對檢驗人員日常工作有所幫助，疏漏之處請指正。