近年來,隨著科學技術的飛速發展及計算機在血液分析儀中的廣泛應用,各種先進的血液分析儀在國內逐漸普及.這種儀器不僅能檢測更多的實驗參數.而且還提供相應的細胞分布直方圖. 國內使用的血液分析儀主要是利用阻抗原理進行細胞計數的.如前所述,不同體積的血細胞,因其電阻大小不同,而產生相應大小的脈沖,分別進入到儀器設置的不同通道(體積段),以通道(單位:飛升) 為橫坐標,相應的細胞數為縱坐標描繪出直方圖.分析細胞直方圖的變化對臨床診斷有重要意義.
一 正常直方圖
1.Coulter JT-IR 型血液分析儀
Coulter JT-IR 型血液分析儀的正常直方圖
正常直方圖特征:
①WBC:儀器在35～450fl范圍內分析白細胞,從中白細胞直方圖上可以明顯地看到三個細胞分布區,左側又高又陡的峰,跨越35～90fl,定為 淋巴細胞峰,以成熟淋巴細胞為主要特征細胞,最右側又低又寬的峰,從 160fl開始,最遠跨越到450fl,定為中性粒細胞峰,以中性粒細胞為主要 特征細胞,也可包含桿狀核和晚幼粒細胞.在兩個峰之間的平坦區,從30 ～160fl 看上去似兩個峰之間的谷,定為單個核細胞區,以單核細胞為主 要特征細胞. 正常外周血中的白細胞以淋巴細胞、單核細胞和粒細胞為 主，白細胞直方圖呈現圖3-1中的正常形態。圖上方的含義報告顯示"Normal Distribution"，分類參數后面沒有任何字母標記。某種細胞 的百分率是其圖上面積與AL+AM+AG的比值.
Coulter JT-IR 型血液分析儀白細胞分類模示圖
正常白細胞出現在35fl以上,低于35fl應是無顆粒的.而且在淋巴細胞與單核細胞之間,單核細胞與中性粒細胞之間均存在一個低谷.如果這些特征消失或出現其它變化,均會出現相應部位的"R"報警.
“R”警號的含義：
R1(提示白細胞直方圖上，淋巴細胞峰左側區域有異常)：可能存在聚集的血小 板、巨大血小板、有核紅細胞、未溶解的紅細胞、蛋白或脂類顆粒
R2(提示白細胞直方圖上，淋巴細胞峰與單核細胞區之間的區域有異常)：可能 存在異型淋巴細胞、漿細胞、非典型淋巴細胞、原始細胞、嗜酸粒細胞增 多、嗜堿粒細胞增多
R3(提示白細胞直方圖上，單核細胞區與中性粒細胞峰之間的區域有異常)：可 能存在未成熟的中性粒細胞、異常細胞亞群、嗜酸細胞增多
R4(提示白細胞直方圖上，中性粒細胞峰右側區域有異常)：表示中性粒細胞絕 對值增高
RM(多部位報警)：表示同時存在兩個或兩個以上的"R"報警。
②RBC:儀器在36～360fl范圍內分析紅細胞,正常紅細胞主要分布在50～ 200fl范圍內,從正常的紅細胞直方圖上，可以看到兩個細胞群體：即紅細胞 主群:從50fl偏上一點開始，有一個看似兩側對稱，較為狹窄的正態分 布曲線。 和大細胞群:位于主群右側，約分布在125～200fl 區域。 圖上 含義報告顯示"Normal Distribution"，各參數后面無任何字母標記。儀
③PLT:器在2～20fl范圍內分析血小板.正常血小板呈對數正態分布, 主要集中在2～15fl內.它包含兩條曲線，一條是2～20fl的直接計數曲線。 另一條是電子擬合線，后者在圖上的顯示范圍為0～36fl 。 圖上含義報告顯示 "Normal Distribution"
2.CELL-DYN 1400型血液分析儀
CD-1400型血液分析儀正常直方圖
正常直方圖特征:
①WBC:儀器在35～350fl的范圍內分析白細胞,其中35～98fl定為淋巴細胞, 98～350fl定為非淋巴細胞(單核細胞+粒細胞). 直方圖在上端連成曲線狀其中某種細胞的百分率是其圖上面積與AL+AG的比值,.
CD-1400型血液分析儀分類模示圖
正常白細胞出現在35fl以上,低于35fl應是無顆粒的,而且在淋巴細胞與非淋巴細胞之間設置有一個正常的標準. 如果被測試標本的白細胞直方圖上的某個位置粒度分布超過了這個設置的標準,就會出現相應的"R"報警.
"R"警號的含義如下:
LYM RO或RM:指<35fl區域的淋巴細胞數超過了設置的正常標準，表示可能存在有核紅細胞、血小板凝塊、大血小板、未完全溶解的紅細胞、冷球蛋白
LYM R1或RM:指>35fl區域的淋巴細胞數超過了設置的正常標準，表示可能存在淋巴細胞增多、淋巴細胞減少、冷球蛋白
LYM R2或RM:指<98fl區域的淋巴細胞超過了正常標準，表示可能存在淋巴細胞增多、淋巴細胞減少、漿細胞、非典型淋巴細胞（>3%）、原始細胞、 嗜堿粒細胞(>5 %)
GRAN R2或RM:指>98fl區域的顆粒細胞超過了正常標準， 表示可能存在淋巴細胞增多、單核細胞增多(15%)、嗜堿粒細胞增多(5%)、嗜酸粒細胞增多(10%)、漿細胞、非典型淋巴細胞(3%)、原始細胞、桿狀核(10%)、 中性粒細胞增多、無顆粒的中性粒細胞(20%)、中性粒細胞減少、血小板凝塊(大)、 溶血過度、溶血不足
②RBC:儀器在50～250fl范圍內分析紅細胞。正常紅細胞主要分布在50～200fl范圍內,呈偏態分布,50fl以前有一個很小的圖形,這是血小板.如果紅細胞體積大小發生變化或異質性改變,均可見紅細胞直方圖左移或右移或出現雙峰.
③PLT:儀器在2～30fl范圍內分析血小板, 直方圖上正常血小板集中在 2 ～ 15fl范圍,呈左偏態分布,在25～30fl處,曲線逐漸接近橫坐標, 如果標本內有小紅細胞,大血小板,聚集的血小板等干擾,均可從其直方圖上反映出來,并顯示"URI"或"LRI"報警.
URI:指20～24fl顆粒范圍(血小板與紅細胞之間)的血小板數超過正常標準, 表示可能存在:大血小板、血小板凝塊、小紅細胞、細胞碎片、纖維蛋白
LRI:指2～3fl顆粒范圍的血小板數超過了正常標準,表示可能存在:小血小板細胞碎片、冷球蛋白、紅細胞包涵體、電噪音干擾
3.AC系列血液分析儀
AC-900系列血液分析儀正常直方圖
正常直方圖的特征:
①WBC:儀器在35～420fl范圍內分析白細胞,其中35～100fl定為淋巴細胞, 100～135fl定為中值細胞(包括單核細胞,嗜酸性粒細胞,嗜堿性粒細胞), 135～4 20fl定為中性粒細胞.直方圖在上端不連成曲線狀,而是直接以脈沖大小顯示,右側與橫坐標重合.其中某種細胞的百分率是其圖上面積與AL+AM+AG的比值,見所示.
AC-900系列血液分析儀分類模示圖
正常白細胞出現在35fl以上,低于35fl是無顆粒的,而且在淋巴細胞與中性粒細胞之間有一定寬度的平坦區(中值細胞區).如果某種細胞增多或減少,或有異常細胞,白細胞直方圖就會發生相應的改變,但無報警信號顯示( 儀器也無此項功能)
②RBC:儀器在30～250fl范圍內分析紅細胞.正常紅細胞主要集中在50～ 200fl之間,且呈左偏態分布.如果紅細胞體積大小發生變化或異質性改變, 均可見紅細胞直方圖左移或右移或出現雙峰.
③PLT:儀器在2～20fl范圍內分析血小板.正常血小板集中在2～15fl范圍,呈左偏態分布,在20fl處,脈沖線很低.改變標本內有小紅細胞、大血小板、 聚集的血小板等干擾，在直方圖上20fl處的脈沖線會增高。
4.Sysmax F-800血液分析儀
正常直方圖特征：
Sysmax F-800血液分析儀正常模示圖
①WBC:儀器在30～300范圍內分析白細胞。 在正常直方圖上可見兩個明顯的細胞亞群，但無報警顯示。直方圖上還有兩條與縱坐標平行的虛線，左側虛線為低鑒別器線（LD），由儀器在30～60fl范圍內自動設置；另一條虛線為波谷鑒別器線（T），儀器根據不同的標本自動尋找波谷確定這條線； 高鑒別器線（UD）在圖上未顯示，一般固定在300fl處。在LD與T之間的小細胞群定為淋巴細胞，T與UD之間的大細胞群定為非淋巴細胞（粒+單），所示。
Sysmax F-800血液分析儀分類模示圖
白細胞直方圖上各種報警的含義：
L:低鑒別器誤差。指該部位的顆粒分布超過了預設限度，表示可能存在大血 小板或聚集的血小板，此時白細胞計數及分類均不準確。
F:小細胞群與大細胞群區分不明確，雖能分類，但分類結果不準確。
T:波谷鑒別器未找到。白細胞不能分類，但不影響白細胞計數的準確性。
U:高鑒別器誤差。指該部位的顆粒分布超過了預設的限度。表示可能是溶血 劑用量不夠或存在異常細胞；如為前者，則白細胞計數及分類結果均不準確。
②RBC:儀器在35～250fl范圍內分析紅細胞。正常紅細胞主要集中在50～150fl范圍，呈左偏態分布。直方圖上有兩條與縱坐標平行的虛線，左側虛線為低鑒別器線（LD），由儀器在25～75fl范圍內自動設置；右側虛線為高鑒別器線（UD）,由儀器在200～250fl范圍內自動設置。
紅細胞直方圖上各種警號的含義:
L:低鑒別器誤差。指該部位的紅細胞分布超過了預設限度， 表示可能存在噪聲干擾、紅細胞碎片、聚集的血小板，此時紅細胞計數值不準確。
U:高鑒別器誤差。指該部位的紅細胞分布超過了預設限度。在絕大多數 情況下是噪音干擾，此時紅細胞計數值不準確。
M:找到多峰。指紅細胞有兩個或兩個以上的分布峰。
D:指紅細胞分布寬度（RDW）分析失敗。
③PLT:儀器在2～30fl范圍內分析血小板。正常血小板呈左偏態分布， 主要集中在2～20fl范圍內。在直方圖上也有兩條與縱坐標平行的虛線； 左側虛線為低鑒別器線（LD）,由儀器在2～7fl范圍內自動設置； 右側虛線為高鑒別器線（UD），由儀器在12～30fl范圍內自動設置。
血小板直方圖上各種警號的含義：
L:低鑒別器誤差。指該部位的血小板分布超過了預設限度，在大多數情況 下是噪音干擾或有聚集的血小板。
U:高鑒別器誤差。指該部位的血小板分布超過了預設限度。最大的可能是 噪音干擾。
M:指血小板有兩個或兩個以上的分布峰。
D:指血小板分布寬度（PDW）分析失敗。
從上述四個廠家的血液分析儀的正常血細胞直方圖可以看出，這些儀器所描繪直方圖是不相同的。這是因為不同廠家生產的血液分析儀，因其所設置的通道數不同，使用試劑的性能不同所致。即使同一份血樣在不同的儀器上得到的直方圖也不同。以白細胞直方圖為例，進行白細胞直方圖分析時，首先要注意血液分析儀的廠家及型號。
五 分析細胞直方圖時應注意的問題
1.如上所述，分析細胞直方圖的變化對臨床診治具有重要意義， 但影響 直方圖變化的因素是多方面的。反映直方圖變化的脈沖的大小除了與細胞本 身體積的大小有關外，還與試劑的性能（如稀釋液的電導率、滲透壓、離子 強度；溶血劑的種類、濃度、用量和溶血時間）及儀器出廠前所固定的閾值、 孔電流和脈沖的增益等有關，白細胞計數時的脈沖大小與上述各種因素都有 關系；而紅細胞和血小板計數時的脈沖大小只與稀釋液的性能和儀器的設置 有關，與溶血劑的性能無關。原裝溶血劑是廠家根據儀器本身的性能特點而 特殊配制的與儀器的性能相匹配的專用試劑，因此，在檢測細胞時能得到最 佳直方圖。以Cell-DYN 1400型血液分析儀的白細胞直方圖為例所示。普通稀釋液加原裝溶血劑得到的白細胞 直方圖的粒細胞左移100～200fl之間的平坦區消失，并有"R2"報警，這與配 套的原裝試劑得到的直方圖有明顯的差別。因此，應盡量使用原裝試劑。
2.注意了解各種試劑的作用。不同的試劑在細胞計數過程中的作用不同， 稀釋液主要作用是在稀釋血液的同時為血細胞提供一個與血漿性質近似的環 境，以保證在一定的時間內維持血細胞原有的體積不變；同時為細胞計數提 供一個導電環境。溶血劑的主要作用是用來測定血紅蛋白和計數白細胞。在 測試過程中，加入的溶血劑一方面溶解紅細胞，釋放出血紅蛋白，并與之結 合成穩定的血紅蛋白衍生物；另一方面作用于白細胞，使其胞質滲出，胞體 收縮，便于白細胞計數及分類。因此，試劑性能的好壞直接影響血細胞直方 圖的變化。以AC-920為例，不同性能的溶血劑，可得到不同的白細胞直方圖,不合格溶血劑的白細胞直方圖分布于 35～190fl內，且淋巴細胞峰與粒細胞峰聚集在一起，中間平坦區消失，MID 值增高，這與合格溶血劑的白細胞直方圖有明顯的差別。因此，了解試劑在 血細胞測定中的作用，對于正確分析直方圖具有重要意義。
3.注意由白細胞直方圖得到的白細胞分類結果不能代替常規方法的白細 胞分類結果。由儀器白細胞分類原理可知，儀器對白細胞的分類不同于常規 的涂片染色分類。常規分類除細胞大小外，還要根據細胞的染色反應，核的 形態及染色質的著**況，胞質的著色及顆粒，才能確定為五類細胞。而血 液分析儀的白細胞分類只是根據溶血劑處理后的細胞大小而分為三種細胞群 體。白細胞直方圖的變化反映的只是某種體積的顆粒，即某種大小的細胞， 而不是某種特殊細胞的變化。因此，不能用儀器分類代替常規方法的分類。 但在白細胞直方圖及計數值均正常的情況下，可作為一種篩選方法。
不合格溶血劑的白細胞直方圖分布于 35～190fl內，且淋巴細胞峰與粒細胞峰聚集在一起，中間平坦區消失，MID 值增高，這與合格溶血劑的白細胞直方圖有明顯的差別。因此，了解試劑在 血細胞測定中的作用，對于正確分析直方圖具有重要意義。
3.注意由白細胞直方圖得到的白細胞分類結果不能代替常規方法的白細 胞分類結果。由儀器白細胞分類原理可知，儀器對白細胞的分類不同于常規 的涂片染色分類。常規分類除細胞大小外，還要根據細胞的染色反應，核的 形態及染色質的著**況，胞質的著色及顆粒，才能確定為五類細胞。而血 液分析儀的白細胞分類只是根據溶血劑處理后的細胞大小而分為三種細胞群 體。白細胞直方圖的變化反映的只是某種體積的顆粒，即某種大小的細胞， 而不是某種特殊細胞的變化。因此，不能用儀器分類代替常規方法的分類。 但在白細胞直方圖及計數值均正常的情況下，可作為一種篩選方法。