一、瑞氏染色
瑞氏染色是血涂片最常用、最經典的染色方法,對細胞質和顆粒染色效果好。
1.染液組成:堿性亞甲藍、酸性伊紅、甲醇(作為溶劑及固定細胞形態)。
2.原理:物理吸附和化學親和作用。
3.染色效果:最適pH為6.4~6.8。
若緩沖液偏酸,則紅細胞和嗜酸性粒細胞偏紅,細胞核呈淡藍色或不著色。
若緩沖液偏堿,細胞染色染成灰藍色,顆粒深暗;嗜酸性粒細胞可染成暗褐色,甚至棕黑色;中性顆粒偏粗,染成紫黑色。
4.注意事項:
①在距玻片另一端2cm處結束涂抹為宜;
②血涂片上有染料顆粒沉積,可滴加甲醇,然后立即用流水沖洗;
③染色過淡,可復染,復染時先加緩沖液再加染液;
④新鮮配制的染液染色效果差,應貯存一段時間,時間越久,染色效果好。
二、吉姆薩染色
吉姆薩染色對細胞核和寄生蟲著色較好。
1.染液組成:天青、伊紅、甲醇、純甘油。
2.原理:同瑞氏染色。
記憶方法:血紅蛋白,嗜酸性顆粒(堿性蛋白質):具有嗜酸性——伊紅結合;
細胞核蛋白、淋巴細胞、嗜堿性粒細胞胞質(酸性蛋白質):具有嗜堿性——亞甲藍結合