寄生于人體的瘧原蟲有4種,即間日瘧原蟲(Plasmodium vivax)、惡性瘧原蟲(Plasmodium falciparum)、三日瘧原蟲(Plasmodium malariae)和卵形瘧原蟲(Plasmodium ovale),分別可以引發間日瘧、惡性瘧、三日瘧和卵形瘧疾病。在我國主要有間日瘧原蟲和惡性瘧原蟲,三日瘧原蟲少見,卵形瘧原蟲罕見。瘧原蟲檢查一般是通過薄、厚血涂片的瑞姬染色,直接查找病原體。
一 患者資料
患者A:李××,男,45,半年前前往印度工作。回國后出現發熱、寒戰等癥狀。2009年8月來我院檢查。
患者B: 于××,因發熱、血小板減少曾在外院就診,2009年11月因血小板減少問題來我院血液科就診。
二 血細胞分析儀測定結果 (表6-1)
單從血細胞分析結果上看,兩患者紅系和粒系均無明顯異常,但血小板明顯減少,并有Flag提示信息。
三 血細胞分析儀散點圖、直方圖和測定數據
患者A:血細胞分析儀XE-2100測定數據和報警信息見圖6-1
患者B:血細胞分析儀XE-2100測定數據和報警信息見圖6-2
患者A:瘧原蟲感染和嗜酸性粒細胞在XE-2100散點圖上的表現特點見圖6-3。瘧原蟲和嗜酸性粒細胞在DIFF散點圖上出現的位置有明顯區別,嗜酸性粒細胞在側向散射光(SSC)上的位置明顯偏右側,而瘧原蟲偏左側。
患者B:瘧原蟲在XE2100散點圖上出現的位置和瘧原蟲見圖6-4瘧原蟲在紅細胞內的生長變化:裂殖子侵入紅細胞內,初期似戒指狀,紅色的核點,蘭色環狀的胞漿,稱為環狀體即小滋養體。環狀體發育長大,胞漿可伸出不規則的偽足,以攝噬血紅蛋白,此為阿米巴滋養體或大滋養體。未被利用的血紅蛋白分解成正鐵血紅素顆粒蓄積在原漿內呈棕褐色,稱為瘧色素。大滋養體繼續發育,其核與原漿進行分裂,形成裂殖體。成熟的裂殖體破裂,裂殖子逸出,一部分再侵入正常紅細胞,一部分被吞噬細胞吞噬。釋出的瘧色素也被吞噬。
XE-2100血細胞分析儀是根據側向角散射光強度和側向熒光強度進行白細胞分類計數。瘧色素是瘧原蟲侵人血細胞消化血紅蛋白后的終產物,是一種雙折光晶體。當瘧原蟲裂殖體破裂,瘧色素從感染的血細胞中釋放出來時,繼而被宿主白細胞所吞噬。因此吞噬了瘧色素的部分中性粒細胞的側向角散射光強度改變,而被顯示在EOS的散點圖區域內。因而出現嗜酸性粒細胞與中性粒細胞間的間距變小的散點圖形。從圖6-3,6-4上可見,瘧原蟲和嗜酸性粒細胞在DIFF散點圖上出現的位置有明顯區別,嗜酸性粒細胞在側向散射光(SSC)上的位置明顯偏右側,而瘧原蟲偏左側。
四 血涂片
在患者血片中發現的瘧原蟲環狀體,裂殖體,滋養體見圖6-5
五 血細胞涂片相關的復檢規則
尚未有相關的血液寄生蟲檢查的復檢規則,但是當臨床醫師有要求時或患者有相應的癥狀及在疫區生活史時,臨床醫生應考慮此問題,均應進行血涂片檢查。
1.A病例同時出現Imm Gran報警信息,因此根據篩檢規則第24條:懷疑性報警IG(不成熟粒細胞)、桿狀核中性粒細胞(Band)報警提示除外。復檢條件:首次成人結果出現陽性報警,復檢要求:涂片鏡檢。該病例同時出現PLT減低。
2. B病例:僅有血小板減低問題,未出現任何報警信息。實驗室根據篩檢規則第7條:PLT首次結果低100×10^9/L規則,涂片鏡檢。而此病例臨床醫生并未提出進行瘧原蟲檢查要求。如不復片檢查,非常容易漏掉。
六 病例討論
當臨床醫生根據患者癥狀要求進行瘧原蟲檢查時,應該認真檢查血涂片,同時用XE-2100血細胞分析儀測定,注意分析散點圖。當未知病例審核報告時,應注意瀏覽XE-2100散點圖,如果見到嗜酸性粒細胞散點圖位置有變異,應觀察血涂片。根據血細胞分析儀散點圖特征,不能確認有瘧原蟲感染,僅可用于過篩,也不能確認瘧原蟲類別。
瘧疾的臨床表現和診斷:曾于瘧疾傳播季節在瘧疾流行區住宿或有輸血史。間歇性定時發作,每天、隔天或隔兩天發作一次。發作時有發冷、發熱、出汗等臨床癥狀。發作多次可出現脾腫大和貧血。
實驗室檢查:紅細胞和血紅蛋白在多次發作后下降,惡性瘧尤重;白細胞總數初發時可稍增,后正常或稍低,白細胞分類單核細胞常增多,并見吞噬有瘧色素顆粒。間接熒光抗體試驗或酶聯免疫吸附試驗抗體陽性。血涂片查見瘧原蟲。其種類有間日瘧原蟲、惡性瘧原蟲,三日瘧原蟲和卵形瘧原蟲。
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