一、臨床標本細菌檢驗的基本程序

二、血液感染
◆正常人的血液是無菌的。
◆菌血癥是指在血液中可檢測到細菌,包括一過性和持續性在血中存在。
◆敗血癥是指病原菌侵入血流后,在其中大量繁殖并產生毒性產物,引起全身中毒癥狀。
◆膿毒血癥是指化膿性細菌敗血癥時,細菌通過血流擴散至全身其他組織或器官,產生新的化膿性病灶。
(一)常見病原菌

(二)標本采集
1.采血時間和頻率
病人發熱初期或高峰期采集,或在未用抗生素前采集。但懷疑細菌性心內膜炎時,血培養不少于三次。
2.采血量
一般為靜脈采血,成人采血量10~20ml,兒童3~5ml,嬰兒1~2ml。
3.床邊直接注入血液培養基,否則用SPS抗凝劑送檢,不得用EDTA,枸櫞酸鈉抗凝。
4.檢查血管內導管有無細菌污染,可無菌操作,剪下導管5cm遠側段,置無菌容器內送檢。
(三)微生物分離培養和鑒定
1.培養基的選擇
用自動血培養分析儀時選用相應的血培養瓶,如需氧+厭氧,需氧+高滲等。
2.分離和鑒定 當觀察有細菌生長時或血培養儀陽性報警時,應及時作如下檢驗:
(1)涂片染色鏡檢,結果及時與臨床聯系;
(2)轉種血平板、巧克力平板、厭氧血平板或其他特殊培養基等分離培養純菌再進行鑒定;
(3)同時做藥敏試驗,結果及時報告臨床作治療參考。
(四)報告方式
陰性結果:
◆7d報告無細菌生長。
◆疑為亞急性細菌性心內膜炎、布魯菌病、厭氧菌血癥、真菌血癥時,血培養至少連續培養2~3周,仍無細菌生長者可報告為陰性。
陽性結果——三級報告方式:
◆第一級報告告知標本已出現陽性并報告直接細菌涂片結果,同時做初步藥敏試驗;
◆第二級是報告初步藥敏結果,同時做正式鑒定和藥敏試驗;
◆第三級報告正式鑒定和藥敏試驗結果。
(五)臨床意義
◆葡萄球菌菌血癥常由癤、癰、膿腫及燒傷創面等原發感染灶繼發,也可由呼吸道感染引起。
◆G-菌主要侵犯危及機體免疫功能低下的病人,耐藥菌株不斷增加。
◆厭氧菌的菌血癥常合并需氧菌感染,臨床癥狀較重而復雜。
◆L型菌的菌血癥主要由于使用抑制細菌細胞壁合成的抗生素后,由缺損細胞壁的細菌感染所致。
◆免疫低下者常出現真菌菌血癥。
◆院內感染菌血癥不斷上升。
三、中樞神經系統感染
(一)常見病原微生物

(二)標本采集
◆用藥前,無菌操作腰穿方法采集2~3ml,盛于無菌試管常溫下立即送檢。
◆天冷時保溫,不可冰箱保存。
◆用于病毒檢測時應冷藏送檢。
(三)檢驗方法
1.涂片鏡檢 離心3000rpm,15分鐘。
革蘭染色(一般細菌)、抗酸染色(分支桿菌)、墨汁染色(隱球菌)、電鏡檢查(病毒顆粒)。
2.分離培養 5g/L葡萄糖增菌肉湯、血平板、中國藍瓊脂平板或麥康凱瓊脂平板、巧克力平板。結核菌接種羅-琴培養基或米氏7H10培養基。真菌培養接種沙氏培養基。病毒培養常用動物接種、雞胚接種、細胞培養。
3.血清學檢測可直接檢測抗原。
(四)臨床意義
◆細菌性腦膜炎是中樞神經系統感染的常見類型。
◆真菌性腦膜炎最常見于隱球菌腦膜炎,其他的真菌性腦膜炎如白假絲酵母、球孢子性腦膜炎日漸增多,特別是免疫功能低下和惡性疾病患者易發。
◆流行性乙型腦炎可獲得持久免疫力,再次發病者極少見。
◆腸道病毒對中樞神經系統的危害性逐漸引起人們的關注和重視。