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  • 發布時間:2021-08-10 15:44 原文鏈接: 質粒DNA的大量提取和純化有哪些步驟

    大提質粒和小提質粒的基本原理是一樣的,都是通過一定的方法(如加堿裂解)使在細菌內大量擴增的質粒釋放出來,然后經過去蛋白去RNA等一系列步驟純化DNA,最終將DNA提取出來。區別:
    1.大提用于大量菌液的提取,100ml-500ml 均可,而小提用的菌液量很少,一般1.5-5ml。
    2.一般試劑盒中大提比小提多了溶菌酶、異丙醇(回收沉淀核酸)、含一定量PEG的氯化物(回收質粒DNA)及乙酸銨等,其作用及目的都是有利于細菌的裂解和質粒的純化,所以大提的產物比小提的量多很多,而且純度很高。
    3.小提一般用于質粒鑒定和對純度要求不是很高的實驗,大提用于質粒的大量提取和轉染等純度要求很高的實驗。

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