實驗材料 瓊脂糖
試劑、試劑盒 溴化乙錠
儀器、耗材 瓊脂糖凝膠電泳裝置紫外燈
實驗步驟
1. 瓊脂糖凝膠電泳裝置
由于瓊脂糖凝膠電泳既要求不高,而適應性又強,在過去15年里已成功地設計了形形色色及大大小小的電泳槽。對這些裝置的選擇主要是依據個人的喜惡。使用最普遍的裝置是Walter Schaffner發明的水平板凝膠。
水平板凝膠通常在一塊可安放于電泳槽平臺的玻璃板或塑料盤上灌制。在有些裝置中,則可將凝膠直接鋪在平臺上。凝膠恰好浸在緩沖液液面下進行電泳。凝膠的電阻幾乎與緩沖液的電阻相同,所以有相當一部分的電流將通過凝膠的全長。
2. 瓊脂糖凝膠的制備
瓊脂糖凝膠的制備是將瓊脂糖在所需緩沖液中熔化成清澈、透明的溶液。然后將熔化液倒入膠模中,令其固化。凝固后,瓊脂糖形成一種固體基質,其密度取決于瓊脂糖的濃度。通貫凝膠的電場接通后,在中性pH值下帶負電荷的DNA向陽極遷移。
3. 瓊脂糖凝膠的染色
電泳完畢,將瓊脂糖凝膠轉移入含EB的染液中,染色10分鐘,取出紫外燈下觀察。