單憑臨床癥狀、病理變化和流行病學資料很難作出診斷，必須靠實驗室診斷才能確診。
1．標本采集
主要采取病山羊初次發熱期的血液，瀕死期的腦和脊髓作10%一20%病毒懸液分離標本。采急性發病期和恢復期雙份血清做血清學診斷的標本。
2．病毒分離
經雞胚絨尿膜和卵黃囊接種或乳鼠腦內接種做病毒分離。雞胚在接種后5一6天死亡，并有肝臟壞死、水腫和黃疽等病變。也可用雞胚成纖維細胞和胎羊腎細胞或Hela細胞、PK15細胞分離病毒，可在3一5天內產生細胞病變。然后用血清學方法鑒定。
3. 血清學檢查
血清學檢查常用中和試驗，用跳躍病毒標準血清與待鑒定病毒懸液混合并感作后，接種乳鼠或羊腎細胞培養。此法特異性較高，有利于跳躍病毒與其他黃病毒的鑒定。血凝抑制試驗、補體結合試驗也可用于血清流行病學調查。此外，還可用蟬媒病毒的cDNA探針進行點雜交，檢測跳躍病。