試劑、試劑盒 TrisNaCl
儀器、耗材 CentriconTM-10 型離心濃縮器大小排阻髙效液相色譜柱
實驗步驟
材料與設備
CentriconTM-10 型離心濃縮器（Amicon，Inc.)
大小排阻髙效液相色譜柱 TSK-GEL G3000 PWXL(7.8x300 mm)(TosoHaas)
50 mmol/L Tris(pH7.9)+200 mmol/LNaCl
操作程序
用大小排阻 HPLC 色譜檢測可溶性單體的形成
1）在擬試的條件下透析樣品。
2）從透析袋中取出樣品，13000r/min 離心 10 min, 使澄清。保留上清。
3) 若透析時樣品的蛋白濃度太低，則可用 Cenricon-10 型離心濃縮器濃縮。于 Centricon-10 管中加 2.0 ml 透析樣品，13000r/min 離心 90 min, 或至體積減至原體積的 1/5~1/10。
注：需要選擇某一孔徑大小的 Centricon 管，以使水和鹽能在離心力作用下透過膜而把σ32 保留下來。Centricon-30 和 Centrioon-100 管的孔徑較大，濃縮也較快，但本實驗采用 Centricon-10 管，其標稱截留分子量為 10000Da, 這是因為σ32 的分子量是 32000Da 而有些σ32 會通過較大的孔透出。Centricon 管也可用來改變樣品的鹽濃度。可簡單地將樣品濃縮 10 倍，再用另一種緩沖液將其恢復至原體積。能處理更小（0.5 ml;Micrecon 型）和更大（20 ml;Centriprep 型）體積的濃縮器也均可從 Amicon 公司買到。
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