1)骨髓采集的方法:供者術前注意休息,保持良好的精神狀況。還應加強營養,但不要食油膩食物,以防骨髓血中脂肪過多,造成骨髓血回輸困難。采集骨髓血前一天需住院,住院當天晚上進半流食,麻醉師將進行相關檢查,告知麻醉期間的相關問題及注意事項,供者簽署麻醉知情同意書。采集骨髓血前12h應禁食、禁水。供者進入手術室,經硬膜外麻醉后采集骨髓血,整個采集骨髓血的過程約需1-2小時。采集點一般為兩側髂后上棘和髂前上棘,采集方法遵循一個部位多方向、多層面的穿刺原則。注射器要預先加入含肝素的RPMI1640細胞培養液,所采集骨髓實際上是血液與骨髓的混合液,又稱為“骨髓血”。采集骨髓血后供者回病房應去枕平臥休息6小時,先不要進食喝水。4小時后可喝少量的水。骨髓血采集量以其含的有核細胞數和患者的體重決定,單獨異基因骨髓移植所需要的有核細胞數最好達到3×108/kg以上,所采骨髓血液的總量約0.5-1升。由于采集的骨髓里有一些骨髓小顆粒,需要采取過濾并壓碎措施,以防骨髓血輸注時發生肺栓塞。常用的過濾方法包括針頭過濾和不銹鋼網過濾。
2)血型不合骨髓的處理:①供者和受者ABO血型主要不合時(即供者有受者不具備的血型抗原),采集的骨髓需應用羥乙基淀粉等方法進行去除紅細胞的處理,以免出現急性溶血反應。處理后所得血漿中富含骨髓細胞,而紅細胞輸回供者。
②供者和患者ABO血型次要不合時(即供者具有受者不具備的血型抗體),當供者的血型抗體滴度高于1:256時,可能導致不同程度的溶血。此時最簡便的方法是離心棄去部分血漿。
③供者和受者ABO血型雙向不合時,按上述兩種方法處理。
3)骨髓輸注:上述骨髓血均有外周靜脈或中心靜脈輸入,所用輸血器中不應有過濾網。異基因骨髓應盡量在采集后6小時內輸完,凍存的自體骨髓應在40℃水浴快速解凍后盡快輸注。由于骨髓中的脂肪可能引起肺栓塞,所以每袋的最后10ml應留在輸液袋內棄去。用肝素抗凝的骨髓輸注時要輸以相當量的魚精蛋白,每100單位肝素需1mg魚精蛋白。