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  • 發布時間:2019-09-14 06:38 原文鏈接: 酪蛋白的制備實驗

    • 等電點沉淀法

               

    實驗方法原理 牛乳中主要的蛋白質是酪蛋白,含量約為35 g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白的混合物,等電點為4.7。利用等電點時溶解度最低的原理,將牛乳的pH調到4.7時,酪蛋白就沉淀出來。用乙醇洗滌沉淀物,除去脂類雜質后便可得到純的酪蛋白。
    實驗材料

    牛乳

    試劑、試劑盒

    乙醇   無水乙醚     醋酸     醋酸鈉  乙醇   乙醚

    儀器、耗材

    離心機   抽濾裝置    精密pH 試紙或酸度計 電爐 燒杯  溫度計

    實驗步驟

    1. 將100 ml牛乳放到500 ml燒杯中,加熱到40 ℃,在攪拌下慢慢地加入預熱到40 ℃、pH 4.7的醋酸-醋酸鈉緩沖液100  ml。用精密pH試紙或酸度計調pH至4.7。將上述懸乳液冷卻至室溫,離心(3000 r/min)10 min,棄去上清液,或4層紗布過濾,得酪蛋白粗制品。
     
    2. 用少量水洗沉淀3次,離心(3000 r/min)10 min,棄去上清液。
     
    3. 在沉淀中加入30 ml乙醇,攪拌片刻,將全部懸乳液轉移至布氏漏斗中抽濾,用乙醇-乙醚混合液洗沉淀2次,最后用乙醚洗沉淀2次,抽干。
     
    4. 取出沉淀,攤開在表面皿上去除乙醚,干燥后得酪蛋白純品。稱重量,計算百分含量。

                展開           
    其他

    1 . 為什么酪蛋白可在等電點pH 下沉淀下來?

    2 . 為什么可以用有機溶劑洗滌蛋白質沉淀?


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