酵母免疫熒光
1）細胞制備
1．培養5ml酵母至對數生長早期（106～107細胞/ml）。
2．直接加1/10體積的甲醛到培養基里固定細胞（加入的甲醛終濃度為3.7％，標準母液是37％）。
3．細胞在甲醛中培養至少1小時。
4．離心收集細胞，用0.1mol/L磷酸鉀（pH7.5）洗一次。
5．把細胞懸浮在1ml的50mg/ml消解酶100T或50單位/ml的溶細胞酶[溶于含有2ml/ml 6-巰基乙醇的0.1mol/L的磷酸鉀溶液中]。
6．置30℃培養30分鐘，用相差顯微鏡檢查原生質的生成率。細胞應呈黑色或半透明灰色，亮細胞（折射體）屬于沒有充分被消化的。菌蛻屬消化過夜。
7．離心收集細胞，懸浮在1ml的PBS中。
2）染色
1．取10ml的1mg/ml聚賴氨酸，放到用特氟隆封閉的（Teflonmasked slides）載玻片（10孔載玻片）上的每個孔，再用蒸餾水洗載玻片，干燥。
2．放10ml固化細胞到每個孔中，幾分鐘后，用PBS抽洗3次。用顯微鏡檢測載玻片確保呈合適的密度而不聚集。
3．該步驟可任選（本實驗不需要使用抗體，但建議使用）：把載玻片浸泡在冷甲醇（－20℃）6分鐘后，然后放到冷丙酮（－20℃）30秒，該處生理產生扁平細胞，有助于細胞骨架的觀察。對于一些抗體-抗原結合物，需要這些步驟重新活化，用PBS重新潤濕玻孔。
4．加15ml由PBS＋3％BSA（牛血清白蛋白）組成的阻斷緩沖液到玻孔中。在保濕盒子中，如墊有濕紙巾的平板中保溫30分鐘。重要的是，在這期間不能讓載玻片孔干透（BSA可通過阻斷蛋白質結合位點降低非特異抗體結合到載玻片）。
5．吸出阻斷緩沖液，用PBS＋3％BSA洗兩次。
6．加10～15ml第一抗體（溶解在PBS＋3％BSA）到載玻片孔中，在一個保濕盒中保溫1小時。用親和純化抗體或單克隆抗體，如果可能，用缺乏目的抗原的同源對照。作一個沒有第一抗體的對照也是有幫助的。
7．吸出第一抗體，用PBS＋3％BSA洗3次。
8．用熒光第二抗體重復第6～7步（在暗處培養）。
9．吸出第二抗體，用PBS＋3％BSA洗3次。
10． 加10～15ml的1μg/ml DAPI到載玻片孔中，培養約1分鐘，用PBS洗3次。
11． 吸出PBS，給每個孔加一小滴封固劑，放蓋玻片，避免在孔中出現氣泡。用紙巾除去多余的封固劑，小心不要移動蓋玻片，用干凈的指甲油密封，－20℃下保存。