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  • 發布時間:2019-09-13 13:15 原文鏈接: 酸化丙酮/甲醇沉淀法實驗

    • 酸化丙酮/甲醇沉淀法實驗

               

    試劑、試劑盒

    鹽酸 丙酮 甲醇

    實驗步驟

    材料

    鹽酸(高純;如 J,T-Baker 的 Ultrex 級)

    丙酮(高純;如 Aldrich 的金標級)

    甲醇(高純;如 Aldrich 或 Burdick&Jackson 的最同市售級)

    操作程序

    本操作程序是根據 Current Protocolsin Molecular Biology —書改進而成的

    1) 配制酸化丙酮:

    丙酮                     120 ml

    HCl                       10ul

    混合,制成1mmol/L 溶液。

    2) 配制沉淀劑:將等體積的酸化丙酮和甲醇混合在一起。置-20℃ 冰箱冷凍。

    3) 真空離心,將蛋白質溶液濃縮至少于 0.1 ml。

    4) 加入過 5 倍量(按體積)的沉淀劑于蛋白質水溶液。徹底混勻,在-20℃ 冰箱中孵育過夜。

    5)4°C 下,用微型離心機的以最高轉速離心 30 min。

    6) 用精細的巴斯德吸管小心移去上清。沉淀物置通風櫥中,用氮氣吹 1h,至干。

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