1. 取 10 μl 細胞在 YPAD 平板上涂布 2 cm2，培養過夜；或者接種 5 ml 的 YPAD 液體培養基，于 30℃ 震蕩培養過夜。
2. 將一瓶 YPAD 培養基于 30℃ 平衡過夜。
3. 去 50 ml YPAD 培養基加到一個滅菌的 250 ml 的培養瓶中，接種一接種環來源于平板的細胞或 5 ml 液體培養基，混勻，測定 5 倍稀釋后的光密度。
4. 于 30℃ 以 200 r/min 振蕩培養，至 10 倍稀釋后 OD600 為 0.2，相當于 2X107 個細胞/ml，需要 3.0~4.5 個小時。該培養物可用于 10 次轉化。
5. 用一個滅菌的 50 ml 離心管收獲培養物，3000 g 離心 5 分鐘。
6. 倒掉培養基，用 20 ml 滅菌水重懸細胞，再次離心。
7. 倒掉水，用 1.0 ml 100 mmol/L 的 LiAc 重懸細胞，并轉移到一個 1.5 ml 的微量離心管中。
8. 用微量離心機以最高轉速離心 15 秒，用微量加樣器吸出 LiAc。
9. 用 100 mmol/L 的 LiAc 重懸細胞，使終體積為 500 μl，于 30℃ 孵育 15 分鐘。
10. 將 1.0 ml 的 ssDNA 樣品煮沸 10 分鐘，于冰水中迅速冷卻。
11. 基本的轉化混合物包括 240 μl 的 PEG、25 μl ssDNA、5.0 μl 質粒 DNA 和 45 μl 水。
12. 渦旋混勻細胞懸液，取 50 μl 加到標記的微量離心管中，離心用微量加樣器除去 LiAc。
13. 向細胞沉淀中加入 350 μl 轉化混合物，劇烈渦旋以重懸細胞。
14. 30℃ 水浴孵育 30 分鐘。
15. 42℃ 水浴熱休克 20 分鐘。
16. 用微量離心機最高速度離心 15 秒，去掉轉化混合物。
17. 每管加 1.0 ml 水，通過吹打和劇烈渦旋以重懸沉淀。
18. 取 10 μl 懸液稀釋到 1.0 ml 滅菌水中，涂 100 μl 該稀釋液到 2 到 3 塊相應 SC 減樣選擇培養基平板上。
19. 將該 SC 減樣選擇培養基平板孵育 2~4 天，以獲得轉化子。
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