重組生物技術制備的單克隆抗體（以下簡稱重組單抗）是生物制品中一類重要的藥物類別。近年來，由于其精確的靶向殺傷和中和等生物學效應，重組單抗在腫瘤、自身免疫性疾病等方面受到了廣泛的研究和應用，并且在神經學、眼科學等其他疾病領域的研究也開始逐步發展起來。目前，國內生產的重組單抗主要采用真核細胞培養表達的方法，在工藝研發和質量研究方面，藥品企業對主要有效成分的結構研究和質量控制關注較多，但是對產品組成中的雜質和相關物質研究較少或關注度不夠。考慮到這些雜質或相關物質是重組單抗產品中的重要組成部分，將會影響到產品的質量、臨床應用的安全性和有效性。
本方法主要采用CAPEL-205高效毛細管電泳儀測定重組治療性單克隆抗體（免疫球蛋白G，IgG）中產物的相關雜質，參照的是美國藥典第129章(Analytical Procedures for Recombinant Therapeutic Monoclonal Antibodies, Capillary SDS electrophoresis) 中的方法，也可以參照中國藥典2015版三部三部通則3127（
單抗分子大小變異體測定法）中的方法。
1測試條件
USP129.還原條件
BGE：按照USP 129 中的凝膠條件
毛細管電泳: Ltot = 30 cm, ID= 50 μm
樣品進樣: -5 kV x 20 sec
電壓: -15 kV
室溫: 25 ОС
檢測波長: 220 nm
樣品: 重組IgG制劑
IS – 內標
LC – 輕鏈
NG – 非糖基化重鏈
HC – 重鏈
USP129.非還原條件
BGE：按照USP 129 中的凝膠條件
毛細管電泳: Ltot = 30 cm, ID= 50 μm
樣品進樣: -5 kV x 20 sec
電壓: -15 kV
室溫: 25 ОС
檢測波長: 220 nm
樣品：重組IgG制劑
IS -內標
F1-F8 -IgG相關雜質（片段）
IgG -完整抗體
2測試結果
圖1 還原條件下的檢測色譜圖
圖2 非還原條件下的 檢測色譜圖
3結論
采用CAPEL-205高效毛細管電泳儀測定重組治療性單克隆抗體（免疫球蛋白G，IgG）中產物的相關雜質，可以實現的IgG產物中的相關雜質的有效分離，方法準確、靈敏度高、重現性好，可以滿足日常分析要求。
4配置列表
儀器配置
CAPEL-205毛細管電泳系統，裝有WINDOWS?XP/ 7/8/10操作系統的筆記本電腦
ELFORUN專用軟件工作站
Capel-205M.jpg
Capel-205毛細管電泳儀的優勢特點
通過施加高壓電場，基于毛細管液體樣本組成成分遷移速度的差別。應用UV吸收檢測技術，在毛細管出口應用高精度光學系統定量檢測分離出的組分
光源：高強度氘燈，優化光學設計保證低檢出限
可實現多種不同分析方法和分離模式，毛細管區帶電泳，毛細管膠束電動色譜，毛細管等電聚集，毛細管凝膠電泳，毛細管等速電泳
全自動進樣，進樣方式可選電動及壓力進樣。壓力進樣，步進值1mbar，最高99mbar；電動進樣，電壓范圍：步進值1kV，1-25kV可調
毛細管冷卻：恒溫水冷系統，環境溫度5-50℃可調；恒溫水冷保證溫度控制更加精細和準確，提高分析效果（相對與風冷，冷卻效果更優/與液冷相比，成本更低）
標準離心管1.5mL(Eppendorf型)適用于所有樣本分析
擴展的全自動進樣器，高達59個進樣位，允許提供自動過夜分析功能
獨特全自動開口進樣設計，避免揮發和交叉污染
新型高壓模塊提供±30kV壓力，保證超優的分析效率和快速分析時間
采用流動電位控制技術，極大提高重現性，尤其是分析復雜樣品更具優勢