以取自陰道后穹窿的分泌物、尿液沉淀物或前列腺液中查見滋養體為確診依據。
常用的方法有:生理鹽水直接涂片法或涂片染色法(瑞氏或姬氏液染色),鏡檢滋養體。也可用培養法,將分泌物加入肝浸液培養基內,37℃溫箱內孵育48小時后鏡檢,檢出率較高,可作為疑難病例的確診及療效評價的依據。