(三)碳源和氮源的利用實驗
唯一碳源利用實驗
(1)原理:
在基礎培養基只提供一種待檢測碳源,若菌株生長則表明菌株能以此種碳源為唯一碳源,否則不能。
(2)培養基:
基本培養基:
(NH4)2HPO41g;NaCl 1g;MgSO4?7H2O 0.2 g;KH2PO40.5 g;瓊脂20g;蒸餾水1000mL;pH7.0-7.2。
各種碳源的終濃度如下:
糖類及其衍生物(醇類,糖苷類等):1%,w/v;多醇和甘油:1%,w/v;苯甲酸鹽,二酸鹽,其它單酸鹽:0.1%,w/v。糖類及其衍生物和多醇要求過濾除菌,鹽類可加入培養基一起滅菌。
(3)實驗方法:
將純的菌株接種到培養基后培養14~28d,觀察其生長情況,以不加碳源的培養基作對照。能夠生長為陽性。
唯一氮源利用實驗
(1)原理:
在基礎培養基只提供一種待檢測氮源,若菌株生長則表明菌株能以此種氮源為唯一碳源,否則不能
(2)培養基:
基礎培養基:
D-Glucose1g;MgSO4?7H2O0.05 g;NaCl 0.05 g;FeSO4?7H2O 0.001 g;KH2PO4 0.01 g。不同氮源按0.5%的濃度加入。
(3)實驗方法:
將純的菌株接種到培養基后培養14~28d,觀察其生長情況,以不加氮源的培養基作對照。能夠生長為陽性。