1.儀器和試劑
高效液相色譜法(hplc)與紫外探測器。
超聲波水浴,
離心機:4000分/分,
恒溫水浴。
乙醇、乙醚、0.01摩爾/升磷酸二氫鈉溶液;
2mol/l氫氧化鈉溶液:20g氫氧化鈉(極好的純),可溶于250毫升水;
無水硫酸鈉。
除說明外,所有試劑均為純分析試劑。
鹽酸克倫特羅標準溶液:儲備溶液,500ug/ml:5毫克克倫特羅鹽酸鹽溶于超純水,加入甲醇lml,再以超純水10ml設定容量;
工作液:儲存的標準液體被稀釋成2.0 ug/ml工作標準液體,用超純水分兩步。
2.樣品處理
在125毫升的漏斗中排出10米的豬糞,將ph值調整為11至12(約8滴),用2mol/ml的納米溶液,用30、25毫升乙醚抽出兩次,每次搖動2分鐘。分層后,通過無水硫酸鈉漏斗(2至3s)將乙醚層(上層)放入100毫升蒸發盤中。然后用少量的己醚清洗剪接漏斗,沖洗無水硫酸鈉。將洗液放入蒸汽碟中,將蒸汽碟放在水面(約60°c)上蒸發蒸發,然后用60%乙醇溶液將殘渣洗凈3次。將其放入容器瓶中,并設置容量2ML,然后用0.5微米雙膜過濾器離心,用高效液相色譜法測定。
3.色譜條件
光譜柱:c18,200毫米×4.6毫米,探測波長:243納米;柱溫:28°c;
注:20 ul;
流動相:0.01m ol/l磷酸二氫鈉+甲醇=67+33
流量:0.8毫升/分鐘。
根據上述色譜條件,采用外部標準方法對保留時間進行了表征,結果通過鹽酸克倫特羅的特征紫外吸收光譜對樣品的掃描光譜進行了證實,然后通過樣品峰值面積與標準峰值面積的比較,計算出鹽酸克倫特羅的含量。