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  • 發布時間:2020-03-20 17:00 原文鏈接: 高通量篩選技術揭示AAV衣殼蛋白是如何演化的?

      在最近一項研究中,研究人員使用腺相關病毒(AAV)載體衣殼庫的高通量篩選來最大程度地獲得具有所需特性的AAV變異體的可能性。這些實驗的結果使他們獲得了一些意想不到的知識,相關結果發表在最近一期的《Human Gene Therapy》雜志上。

    (圖片來源:www.pixabay.com)

      文章作者是來自斯坦福大學的Mark Kay和他的同事們,在這一題為 “Tracking Adeno-Associated Virus Capsid Evolution by Thigh-Throughput Sequencing”的文章中,研究人員使用高通量篩選帶條形碼的AAV衣殼庫來跟蹤定向AAV衣殼的進化。最終目標是能夠更快地鑒定出改良的重組AAV載體,以用于臨床基因治療試驗。

      以下是最重要的發現:首先,使用多輪選擇并不是必須的,實際上可能適得其反。僅經過一輪選擇,即可獲得功能有效的AAV變體。另外,具有高MOI的感染顆粒比具有低MOI的感染顆粒更加有效,因為使用低MOI會導致篩選之間的差異更大,并且后者并不是最理想的選擇。此外,在已經感染了不同的AAV的細胞中,不同的衣殼蛋白之間會發生競爭。

      “作者的這項工作正在幫助我們進一步地理解AAV衣殼的定向進化的路徑,最終使之不再是'黑匣子',” Isaac Haidak教授說:“這一發現可能導致新的,更加重要的衣殼蛋白被發現,而在目前的條件下這些衣殼可能會被忽略。”

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