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  • 發布時間:2012-12-31 00:00 原文鏈接: 高通量細胞分析產品推薦

      生化藥物篩選雖然十多年前就已經規范化了,但藥物療效并不是總能實現預期效果的。在試管中看起來效果不錯的靶標,在動物或者人類試驗中卻結果不佳,這一部分是由于毒性的問題,另外一部分則是由于藥物在體內被處理的過程,與在單純化學相互作用環境中的不同。科學家們希望能通過以細胞為基礎的分析方法,來進行藥物研發的工具,增加篩選的力度。

      雖然目前細胞內醫藥研究,還離在一個完整有機體進行研究,相差甚遠,不過正如IntelliCyt Corporation 公司的CEO: R. Terry Dunlay所說的那樣,“在一個完整工作體系中進行研究,是生物學研究的第一級水平”。利用細胞培養,研究人員能通過一些可支付得起的高通量平臺,盡可能的接近于完整機體,進行研究。事實上,Dunlay認為目前超過一半的新藥研發,都是通過細胞分析方法了。

      但是以細胞為基礎進行篩選,也面臨著一些挑戰,這種分析有時被稱為“黑匣子”檢測,因為很難確定在加入實驗所需藥物后,細胞中到底會發生什么,也很難檢測到實驗結果與加入藥物之間的關聯,Promega公司的一位資深產品專員Terry Riss說。比如,如果實驗分析中所有的腫瘤細胞都死亡了,那么研究人員還需要進一步實驗,分析這種藥物如何令細胞死亡的。

      而且細胞也是十分敏感的,它們的反應也會出現變化,隨著細胞數量,作用時間而發生改變,即使是最悉心照料的細胞培養物也是多種物質的化合物,因此有些細胞也許會對某種藥物立即產生反應,而同一容器中的另外一些細胞則要一段時間才會出現反應。

      因此,在檢測之前需要仔細考慮細胞培養的時間,Riss建議道,“這是一個最常見的問題,”他說,“有時研究人員會錯過了窗口期。”比如說,細胞凋亡的檢測需要測量caspase的活性,但如果等待時間過長,細胞可能就已經死了,caspases也降解。

      為此The Scientist雜志近期總結了幾種高通量細胞分析產品,能令細胞分析發揮最大的作用。

      細胞遷移分析

      腫瘤細胞,以及其它幾種細胞都具有遷移性,Platypus Technologies LLC公司開發了一種分析試劑:Oris Pro Cell Migration Assay能用于分析此類細胞。

      Platypus公司主要專注于細胞遷移及細胞入侵研究領域,這一款細胞遷移檢測試劑盒利用一種專有的生物相容性凝膠(BCG),具有自動化液體處理功能,可以可視化觀察細胞遷移的過程。

      當將細胞接種到每個孔中時,細胞就能填滿整個表面,除了覆蓋凝膠的地方,后者會阻止細胞進入,但在液體介質注入后,很快這些凝膠就會溶解,細胞就能進入孔洞中。之后給細胞大約一天的時間遷移,研究人員就能通過酶標儀或顯微鏡分析細胞的數量,從而了解它們如何運動的了。例如,研究人員可以對已有熒光標記的肌動蛋白染色,熒光最亮的那個孔,就是運動最多的那種細胞了。

      利用Oris,能得到與經典細胞劃痕試驗相似的數據,因此科學家們可以利用這種方法,檢測藥物對細胞生長,炎癥,以及傷口上的細胞遷移的藥效,而且也可以用于分析癌細胞遷移情況。來自Broad研究院的Shrikanta Chattopadhyay表示,利用這種方法,他們分析了其它類型細胞如何影響乳腺癌細胞的遷移擴散。

      分析通量:Chattopadhyay說,一次384孔板篩選需要16分支,他利用的是Molecular Devices的ImageXpress Micro System自動顯微設備。

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