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  • 發布時間:2019-12-04 17:32 原文鏈接: 雞胰島素樣生長因子1(IGF1)酶聯免疫分析試劑盒說明

    使用目的:

    本試劑盒用于測定雞血清、血漿及相關液體樣本中胰島素樣生長因子 1(IGF-1)含量。

    實驗原理

    本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中雞胰島素樣生長因子  1(IGF-1)胰島素樣生長因子 1(IGF-1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胰島素樣生長因子 1(IGF-1),再與  HRP 標記的胰島素樣生長因子 1(IGF-1)抗體。用純化的雞,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP  酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰島素樣生長因子1(IGF-1)呈正相關。用酶標儀在  450nm 波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中雞胰島素樣生長因子 1(IGF-1)濃度。

    標本要求

    1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融

    2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(HRP)活性。

    操作步驟

    1.  標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

    2.  加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl(樣品最終稀釋度為 5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

    操作程序總:

    計算以標準物的濃度為橫坐標, OD值為縱坐標,在坐標紙上,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。



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