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一般來講，進行real-time qPCR MasterMix都是2×的濃縮液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR靈敏度高，所以每個樣品至少要做3個平行孔，以防在后面的數據分析中，由于Ct相差較多或者SD太大，無法進行統計分析。通常來講，反應體系的引物終濃度為100-400mM；模板如果是總RNA一般是10ng-500，如果cDNA，通常情況下是1ul或者1ul的10倍稀釋液，要根據目的基因的表達豐度進行調整。當然這些都是經驗值，在操作過程中，還需要根據所用MasterMix，模板和引物的不同進行優化，達到一個最佳反應體系。在反應體系配置過程中，有下面幾點需要注意：1. MasterMix不要反復凍融，如果經常使用，最好溶解后放在4度。2. 更多的配制Mix進行，減少加樣誤差。最好能在冰上操作。3. 每管或每孔都要換新槍頭！不要連續用同一個槍頭加樣！4. 所有成分加完后，離心去除氣泡。5. 每......閱讀全文
多少同學能將 RT-PCR、Realtime-PCR、QPCR區分開？有多少同學還在犯暈？今兒這貼，師兄就帶你區分區分，撥開那扇 PCR 迷霧。什么是 RT-PCR？RT-PCR就是逆轉錄 PCR（reverse transcription PCR）或者稱反轉錄PCR(reverse tr
qPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System。即實時熒光定量核酸擴增檢測系統，也叫實時定量基因擴增熒光檢測系。qPCR主要是利用插入性染料或熒光探針（比如TaqMan），人們可以通過監控PCR過程中的熒光強度比較多個樣品的DNA水平。
實時熒光定量PCR技術(Real-Time Quantitative PCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。 在對熒光定量PCR結果進行分析時首先要了解幾個概念： 基線（Baseline）指在PCR擴
(二輪通知 2017年7月10~19日，北京） 中國醫學科學院基礎醫學研究所∕北京協和醫學院基礎學院在醫學領域具有國內一流的影響力和知名度，以尖端的醫學研究及出色的理論和實驗教學成為著名的醫學科學研究與教育基地。為了培養生物醫學領域創新人才，現推出一年一度的，以尖端儀器和實戰訓練為特色的“大型儀器
2016年寒假生物醫學大型儀器理論與實驗技術培訓班二輪通知（2016年1月20~28日） 中國醫學科學院基礎醫學研究所∕北京協和醫學院基礎學院在醫學領域具有國內一流的影響力和知名度，以尖端的醫學研究及出色的理論和實驗教學成為著名的醫 學科學研究與教育基地。為了培
點擊此處下載完整蓋章版培訓班二輪通知 中國醫學科學院基礎醫學研究所∕北京協和醫學院基礎學院在醫學領域具有國內一流的影響力和知名度，以尖端的醫學研究及出色的理論和實驗教學成為著名的醫 學科學研究與教育基地。為了培養生物醫學領域創新
一般來講，進行real-time qPCR MasterMix都是2×的濃縮液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR靈敏度高，所以每個樣品至少要做3個平行孔，以防在后面的數據分析中，由于Ct相差較多或者SD太大，無法進行統計分析。通常來講，反應體系的引物終濃度為10
一般來講，進行real-time qPCR MasterMix都是2×的濃縮液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR靈敏度高，所以每個樣品至少要做3個平行孔，以防在后面的數據分析中，由于Ct相差較多或者SD太大，無法進行統計分析。通常來講，反應體系的引物終濃度為100-400