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    原代細胞的脂類染色方法蘇丹紅Ⅲ染色法

    實驗方法原理 蘇丹紅染料在脂類物質中的溶解度大于其在溶劑中的溶解度,如果染料與含有脂類的試樣接觸,便有大量染料進入脂類物質的結構內,使這些結構呈紅色。多用蘇丹紅染料、油紅O、尼羅藍等溶于脂類的染料染色,使脂質呈色。也可用四氧化鋨染色,脂肪酸或膽堿可使四氧化鋨還原為二氧化鋨而呈黑色。 實驗材料 細胞樣品 試劑、試劑盒 蘇丹紅Ⅲ 70%乙醇 甲醛 CaCl2 明膠 蒸餾水 甘油 苯酚 ......閱讀全文

    原代細胞組成結構

    原代細胞組成結構1、 血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、 細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、 組

    原代細胞的取材

    一、取材的基本要求(1)取材要注意新鮮和保鮮新鮮組織易于培養成功,取材時應盡量在4~6h內能制作成細胞,盡快入箱培養,若不能即時培養,應將組織浸泡于培養液內,于4℃存放。若組織塊較大,應在清除表面血塊、壞死組織、脂肪和結締組織后,切碎于培養液內4℃存放,但時間不能超過24h。對于已切碎的組織或血液、

    細胞原代培養

    一、原理將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖,這一過程稱原代培養。二、儀器、材料及試劑儀器:培養箱(調整至37℃),培養瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、紗布、手術

    什么是原代細胞?

    原代細胞(primary culture cell)是指從機體取出后立即培養的細胞。有人把培養的第1代細胞與傳10代以內的細胞統稱為原代細胞培養。原代細胞不僅廣泛應用于分子、細胞生物學和生物醫學基礎研究,如蛋白質組學、基因組學、細胞株(系)研究、DNA,RNA和遺傳學研究等,還可應用于當今熱門的生物

    原代細胞純化方法

      (1)胰蛋白酶 純化法  ●在去除不需要的組織后,使用無菌的解剖刀和剪子把剩余的組織切成3~4 mm小片,通過懸浮在無鈣鎂的平衡鹽溶液中清洗組織碎片。讓組織碎片沉淀,去除上清液。重復清洗2到3次。  ●將盛有組織碎片的容器置于冰上,去除殘留的上清液。加入0.25%溶解在無鈣鎂的平衡鹽溶液中的胰蛋

    什么是原代細胞

      原代細胞(primary culture cell)是指從機體取出后立即培養的細胞。有人把培養的第1代細胞與傳10代以內的細胞統稱為原代細胞培養。原代細胞不僅廣泛應用于分子、細胞生物學和生物醫學基礎研究,如蛋白質組學、基因組學、細胞株(系)研究、DNA,RNA和遺傳學研究等,還可應用于當今熱門的

    原代細胞傳代技術

    一、貼壁細胞的消化法傳代1、吸除或倒掉瓶內舊培養液。2、加入1ml左右消化液(胰蛋白酶或與EDTA混合液)輕輕搖動培養瓶,使瓶底細胞都浸入溶液中。3、消化2-5分鐘后把培養瓶放置在顯微鏡下進行觀察,發現原貼壁的細胞逐漸趨于圓形,在還未漂起時,棄去消化液,加入培養液終止消化。4、用吸管將貼壁的細胞吹打

    原代細胞應用困局

      經過一次傳代后,原代細胞培養物就會成為二級細胞培養物,也稱為細胞株。然而,盡管稱為細胞株,但其壽命是有限的(除非如前所述永生化)。這種有限的分裂能力體內的細胞相似,一旦細胞在體內完全分化以發揮其特殊功能,細胞將停止增殖-這是固有的癌癥保護性衰老過程。此外,某些原代細胞有絲分裂后,無論是在體內或體

    原代細胞永生化?

      原代細胞因它可以模仿人體的新陳代謝逐日成為科研學者青睞的研究工具,但是原代細胞曾是出了名的難培養,需要耗費大量的時間、成本和資源。即使細胞捱過了極其嚴苛的解離步驟,但污染仍然是一個隱患,有可能讓幾天的成果化為烏有。此外還存在其他細胞污染、生長緩慢以及數量有限的問題。  細胞系因容易培養且產量可觀

    原代細胞分離技術

    實驗概要本文介紹了原代細胞分離技術,包括懸浮細胞的分離方法和實體組織材料的分離方法。實體組織材料的分離方法有機械分散和消化分離兩種。實驗步驟1. 懸浮細胞的分離方法?? 1) 將血液、羊水、胸水或腹水等懸液直接轉至離心管中,1000rpm/分鐘離心5分鐘。?? 2) 去掉上清,離心沉淀用無鈣、鎂的P

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