基因組DNA的提取通常用于構建基因組文庫、Southern雜交(包括RFLP)及PCR分離基因等。利用基因組DNA較長的特性,可以將其與細胞器或質粒等小分子DNA分離。加入一定量的異丙醇或乙醇,基因組的大分子DNA即沉淀形成纖維狀絮團飄浮其中, 可用玻棒將其取出,而小分子DNA則只形成顆粒狀沉淀附于壁上及底部, 從而達到提取的目的。在提取過程中,染色體會發生機械斷裂,產生大小不同的片段,因此分離基因組DNA時應盡量在溫和的條件下操作,如盡量減少酚/氯仿抽提、混勻過程要輕緩, 以保證得到較長的DNA。一般來說,構建基因組文庫, 初始DNA長度必須在100kb以上,否則酶切后兩邊都帶合適末端的有效片段很少。而進行RFLP和PCR分析, DNA長度可短至50kb, 在該長度以上,可保證酶切后產生RFLP片段(20kb以下),并可保證包含PCR所擴增的片段(一般2kb以下)。 不同生物(植物、動物、微生物)的基因組DNA的提取......閱讀全文
一、RNA 制備 模板mRNA 的質量直接影響到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的結構特點,容易受RNA 酶的攻擊反應而降解,加上RNA 酶極為穩定且廣泛存在,因而在提取過程中要嚴格防止RNA 酶的污染,并設法抑制其活性,這是本實驗成敗的關鍵。所有的組織中均存在RNA 酶,人
DNA的不同提取方法及比較傳統的DNA提取方法傳統的DNA 提取與純化,如 CTAB 法、SDS 法是在裂解細胞的基礎上,多次苯酚氯仿等有機溶劑抽提使蛋白質變性沉淀于有機相,而核酸保留在水相,達到分離核酸的目的;加入RNA 酶除去核酸中的RNA; 然后加入異丙醇、乙醇等沉淀DNA;用70
幾乎在每個實驗室,與生物分子相關的分離純化工作都是十分重要,且必不可少的。但要對多個樣品進行純化還是相當困難的,不僅需要選擇合適的純化技術,而且工作量也特別大,很難滿足當前飛速發展對高通量樣品進行提取純化的需求。磁珠自動核酸提取純化系統是使用磁珠法技術,可廣泛應用于基因組學、疾控醫療、食品安全、法醫
幾乎在每個實驗室,與生物分子相關的分離純化工作都是十分重要,且必不可少的。但要對多個樣品進行純化還是相當困難的,不僅需要選擇合適的純化技術,而且工作量也特別大,很難滿足當前飛速發展對高通量樣品進行提取純化的需求。TIANLONG NP968磁珠提取純化系統是使用磁珠法技術,可同時操作1-32個樣品,
幾乎在每個實驗室,與生物分子相關的分離純化工作都是十分重要,且必不可少的。但要對多個樣品進行純化還是相當困難的,不僅需要選擇合適的純化技術,而且工作量也特別大,很難滿足當前飛速發展對高通量樣品進行提取純化的需求。TIANLONG NP968磁珠提取純化系統是使用磁珠法技術,可同時操作1-32個樣
幾乎在每個實驗室,與生物分子相關的分離純化工作都是十分重要,且必不可少的。但要對多個樣品進行純化還是相當困難的,不僅需要選擇合適的純化技術,而且工作量也特別大,很難滿足當前飛速發展對高通量樣品進行提取純化的需求。TIANLONG NP968磁珠提取純化系統是使用磁珠法技術,可同時操作1-32個樣
技術原理:KingFisher系列產品是適于分離DNA/RNA、蛋白和細胞的全自動提取純化系統,專為解決客戶現在和未來的所有純化問題而設計。創新的產品基于專利的KingFisher技術(專利號US 6447729, US 6448092),通過特制的磁棒吸附、轉移和釋放磁珠,從而實現磁珠/樣
從真核生物的組織或細胞中提取mRNA,通過酶促反應逆轉錄合成cDNA的第一鏈和第二鏈,將雙鏈cDNA和載體連接,然后轉化擴增, 即可獲得cDNA文庫,構建的cDNA文庫可用于真核生物基因的結構、表達和調控的分析;比較cDNA和相應基因組DNA序列差異可確定內含子存在和了解轉錄后加工等一系列問題。總之
眾所周知,在DNA、RNA和蛋白質的提取過程中,生物樣本的破碎和勻漿是關鍵的第一步。誰不想來個開門紅?當然,這并非易事。利用傳統的液氮研磨,不光費時費力,效果還不是太穩定。尤其在處理多個樣本時,面對那一堆研缽,手忙腳亂不說,交叉污染也是個不得不重視的問題。世界那么大,你應該去看看。如今,機械的樣品裂
第一節 概 述 從真核生物的組織或細胞中提取mRNA,通過酶促反應逆轉錄合成cDNA的第一鏈和第二鏈,將雙鏈cDNA和載體連接,然后轉化擴增, 即可獲得cDNA文庫,構建的cDNA文庫可用于真核生物基因的結構、表達和調控的分析;比較cDNA和相應基因組DNA序列差異可確定內含子存在和了解轉錄后加工
第一節 概 述 從真核生物的組織或細胞中提取mRNA,通過酶促反應逆轉錄合成cDNA的第一鏈和第二鏈,將雙鏈cDNA和載體連接,然后轉化擴增, 即可獲得cDNA文庫,構建的cDNA文庫可用于真核生物基因的結構、表達和調控的分析;比較cDNA和相應基因組DNA序列差異可確定內含子存在和了
一、核酸提取技術的改進進行分子生物學研究的前提是取得高數量和高質量的核酸,即DNA和RNA。由于隱球菌細胞壁外有一層厚厚的莢膜,為破除真菌細胞壁造成很大困難。可靠地提取隱球菌DNA的方法建立于20世紀80年代后期,研究者先后建立了玻璃珠方法、超聲粉碎、液氮冷凍研磨等破壁技術。后來,發展酶學方法取代物