逆轉錄的特點和過程
以RNA鏈為模板,經逆轉錄酶(即依賴于RNA的DNA聚合酶)催化合成DNA鏈,叫做逆轉錄。這種機制在RNA腫瘤病毒中首先發現。RNA聚合酶是以DNA為模板的RNA聚合酶,也稱轉錄酶。原核生物的RNA聚合酶分子量很大,通常由5個亞基組成;兩個α亞基,β,β′和σ,可寫作α2ββ′σ。含有5個亞基的酶叫全酶,失去σ亞基的叫核心酶(α2ββ′)。后來發現,核心酶還有一個亞基ω,因此,核心酶的亞基組成可表示為α2ββ′ω,全酶的亞基組成可以表示為α2ββ′ωσ。核心酶也能催化RNA的合成,但沒有固定的起始點,也不能區分雙鏈DNA的信息鏈與非信息鏈。σ亞基能識別模板上的信息鏈和啟動子,因而保證轉錄能從固定的正確位置開始。β和β′亞基參與和DNA鏈的結合。兩個相同的α亞基負責識別和結合啟動子,決定了基因轉錄的特異性。ω亞基的具體作用則尚未明確。真核生物RNA聚合酶有3類(不包括真核細胞線粒體中類似原核的RNA聚合酶),由8~12條亞基組成,......閱讀全文
逆轉錄的特點和過程
以RNA鏈為模板,經逆轉錄酶(即依賴于RNA的DNA聚合酶)催化合成DNA鏈,叫做逆轉錄。這種機制在RNA腫瘤病毒中首先發現。RNA聚合酶是以DNA為模板的RNA聚合酶,也稱轉錄酶。原核生物的RNA聚合酶分子量很大,通常由5個亞基組成;兩個α亞基,β,β′和σ,可寫作α2ββ′σ。含有5個亞基的酶叫
逆轉錄酶的特點和用途
逆轉錄酶 是一種依賴RNA的DNA聚合酶。此酶首先是1970年從鼠白血病毒和勞氏肉瘤病毒中發現的。這兩個課題組的論文都發在了同一期的《Nature》雜志上。最普遍使用的是從鳥類骨髓母細胞瘤病毒(AMV)分離出來的。活性:一種可以有效地將mRNA反轉錄成DNA的酶,其產物稱為cDNA(compleme
概述逆轉錄的過程
逆轉錄過程由逆轉錄酶催化,此酶也稱依賴RNA的DNA聚合酶(RDDP),即以RNA為模板催化DNA鏈的合成。合成的DNA鏈稱為與RNA互補DNA(complementary DNA, cDNA)。逆轉錄酶在生物界存在于逆轉錄病毒以及真核細胞(如端粒酶)中,擬逆轉錄病毒沒有單獨的逆轉錄酶,其DNA
逆轉錄的簡要過程表示和病毒復制方式
簡要過程表示 逆轉錄酶的作用是以dNTP為底物,以RNA為模板,tRNA(主要是色氨酸tRNA)為引物,在tRNA3'-末端上,按5'→3'方向,合成一條與RNA模板互補的cDNA單鏈,它與RNA模板形成RNA-cDNA雜交體。隨后又在反轉錄酶的作用下,水解掉RNA鏈,
逆轉錄過程介紹
逆轉錄過程由逆轉錄酶催化,此酶也稱依賴RNA的DNA聚合酶(RDDP),即以RNA為模板催化DNA鏈的合成。合成的DNA鏈稱為與RNA互補DNA(complementary DNA,?cDNA)。逆轉錄酶在生物界存在于逆轉錄病毒以及真核細胞(如端粒酶)中,擬逆轉錄病毒沒有單獨的逆轉錄酶,其DNA聚合
RNA逆轉錄(RT)過程
一,準備工作? ? 1, 實驗器具與材料: (1)移液槍:200ul、10ul (2)吸頭:200ul、20ul (3)EP 管 1.5ml、100ul (4)水浴箱 2,實驗器具的處理與準備? ? 逆轉錄(RT)? ? 塑料制品:(包括吸頭、EP 管等)? ? 將塑料制品逐個浸泡于 1‰DEPC
絮凝的過程和特點
絮凝是指使水或液體中懸浮微粒集聚變大,或形成絮團,從而加快粒子的聚沉,達到固-液分離的目的,這一現象或操作稱作絮凝。通常絮凝的實施靠添加適當的絮凝劑,其作用是吸附微粒,在微粒間“架橋”,從而促進集聚。膠乳工業中,絮凝是膠乳凝固的第一階段。絮凝劑通常為銨鹽一類電解質或有吸附作用的膠質化學品。
關于AMV逆轉錄酶的特點和應用介紹
一、特點介紹 1.高靈敏度2、高得率 3.高達60℃的反應溫度可有效打開rna二級結構 4.可合成長至10-12kb的cdna 5.rt反應液可適用不同用途 二、應用 1.1μg helatotalrna在42℃,50℃,55℃,60℃經amv酶逆轉錄后進行pcr的產物電泳結果2、1
逆轉錄病毒的特點
1)病毒為球形,直徑100~120納米,衣殼20面體立體對稱,有包膜;2)基因組為二倍體(唯一基因組非單倍體的病毒),兩個相同+ssRNA;3)含有逆轉錄酶和整合酶;4)復制通過DNA中間體,并與宿主細胞的染色體整合(唯一會主動整合的病毒);5)具有gag、pol、env編碼基因,以及長末端重復序列
逆轉錄酶的作用過程
逆轉錄酶的作用是以dNTP為底物,以RNA為模板,tRNA(主要是色氨酸tRNA)為引物,在tRNA3'-末端上,按5'→3'方向,合成一條與RNA模板互補的cDNA單鏈,它與RNA模板形成RNA-cDNA雜交體。隨后又在反轉錄酶的作用下,水解掉RNA鏈,再以cDNA為模板合
簡述逆轉錄病毒的特點
1)病毒為球形,直徑100~120納米,衣殼20面體立體對稱,有包膜; 2)基因組為二倍體(唯一基因組非單倍體的病毒),兩個相同+ssRNA; 3)含有逆轉錄酶和整合酶; 4)復制通過DNA中間體,并與宿主細胞的染色體整合(唯一會主動整合的病毒); 5)具有gag、pol、env編碼基因
逆轉錄酶的活性特點
①DNA聚合酶活性;以RNA為模板,催化dNTP聚合成DNA的過程。此酶需要RNA為引物,多為賴氨酸的tRNA,在引物tRNA 3'-末端以5'→3'方向合成DNA。反轉錄酶中不具有3'→5'外切酶活性,因此沒有校正功能,所以由反轉錄酶催化合成的DNA出錯率比
RNA的轉錄和逆轉錄
轉錄是以DNA為模板合成RNA的過程,經過轉錄DNA分子中的貯存信息傳遞到RNA分子中,再由mRNA做為模板合成蛋白質分子。逆轉錄也是從RNA的一個特定位置開始的,以RNA分子中的一條鏈為模板,在逆轉錄酶的作用下,以四種脫氧核苷酸為原料,合成方向仍是5'→3',完成cDNA的合成。大
卵原細胞的特點和增殖過程
對于人類來說,卵原細胞的增殖期到胚胎發育結束時已完成。胚胎在母體子宮內發育到約第三個月時,胚胎的卵巢中卵原細胞開始進行細胞分裂,并生長增大,發育成初級卵母細胞。因此,女性生殖周期中能夠分化成卵的所有卵原細胞在誕生之前就已經形成了。
異構化的過程和特點
異構化是可逆反應,反應常常可進行到接近平衡轉化率。由于反應熱效應很小,溫度對平衡組成影響不甚顯著,但低溫操作有利于減少副反應。液相異構化反應溫度一般為 90~150°C;氣相異構化反應溫度則為300~500°C;氣相非臨氫異構化可在低壓(約0.3MPa)下進行,氣相臨氫異構化則需較高壓力(2.0~2
變態反應的過程和特點
變態反應的發生可分為兩個階段:致敏階段,當機體初次接觸變應原后,需要有一個潛伏期(1~2周),免疫活性細胞才能產生相應抗體或致敏淋巴細胞,在此期間機體無任何異常反應,但已具備了發生變態反應的潛在能力。變態反應發生階段,當致敏機體再次與同一變應原接觸,變應原與相應抗體或致敏淋巴細胞結合,引起機體生理功
組織培養的過程和特點
植物細胞具有全能性。 根據這個理論,用植物的組織培養技術, 可以完成植物的繁殖。植物組織培養的大致過程如下:在無菌的條件下,將植物器官、組織、細胞切下,放在適當的人工培養基上培養,這些器官或組織就會進行細胞分裂,形成新的組織。不過,這種組織沒有發生細胞分化,在適當的光照、溫度和一定的營養物質與植物激
RNA復制的轉錄與逆轉錄的過程介紹
轉錄是以DNA為模板合成RNA的過程,經過轉錄DNA分子中的貯存信息傳遞到RNA分子中,再由mRNA做為模板合成蛋白質分子。逆轉錄也是從RNA的一個特定位置開始的,以RNA分子中的一條鏈為模板,在逆轉錄酶的作用下,以四種脫氧核苷酸為原料,合成方向仍是5'→3',完成cDNA的合成
逆轉錄病毒載體的特點
保留病毒顆粒的包裝信號,而缺失病毒顆粒包裝蛋白基因;它可以克隆并表達外源基因,但不能自我包裝成有增殖能力的病毒顆粒。
逆轉錄病毒的主要特點
1)病毒為球形,直徑100~120納米,衣殼20面體立體對稱,有包膜;2)基因組為二倍體(唯一基因組非單倍體的病毒),兩個相同+ssRNA;3)含有逆轉錄酶和整合酶;4)復制通過DNA中間體,并與宿主細胞的染色體整合(唯一會主動整合的病毒);5)具有gag、pol、env編碼基因,以及長末端重復序列
逆轉錄病毒有哪些特點?
1)病毒為球形,直徑100~120納米,衣殼20面體立體對稱,有包膜; 2)基因組為二倍體(唯一基因組非單倍體的病毒),兩個相同+ssRNA; 3)含有逆轉錄酶和整合酶; 4)復制通過DNA中間體,并與宿主細胞的染色體整合(唯一會主動整合的病毒); 5)具有gag、pol、env編碼基因
精原細胞的功能特點和分化過程
精原細胞是指由睪丸精子管上皮的原始生殖細胞經過多次有絲分裂而形成的細胞。原始的胚細胞經分化形成精原細胞,精原細胞經復制形成初級精母細胞,初級精母細胞經過減數第一次分裂后形成次級精母細胞,再經過減數第二次分裂形成精細胞。精細胞經過變形最終形成精子。
DNA疫苗的特點和研發過程
DNA疫苗安全性好,制備、儲存方便,可在同一個質粒載體上克隆多個目的基因從而達到一種疫苗預防多種疾病的效果,更重要的是它模擬了自然狀態下機體感染外源性病原微生物后在體內表達抗原及誘生免疫反應的過程。1989年,Wolff將DNA質粒注射到小鼠的骨骼肌后,意外地發現外源基因可以在骨骼肌細胞中表達,且表
電融合法的特點和基本過程
與PEG融合比較起來,電融合有三大優點:一是不存在對細胞的毒害問題;二是融合效率高;三是融合技術操作簡便。電融合儀的結構特點:一是交變電場部分;一是高頻直流電擊部分。電融合的基本過程:細胞膜的接觸:當原生質體置于電導率很低的溶液中時,電場通電后,電流即通過原生質體而不是通過溶液,其結果是原生質體在電
細胞融合的基本過程和特點
細胞融合(cell fusion),細胞遺傳學名詞,是在自發或人工誘導下,兩個細胞或原生質體融合形成一個雜種細胞。基本過程包括細胞融合形成異核體(heterokaryon)、異核體通過細胞有絲分裂進行核融合、最終形成單核的雜種細胞。細胞融合可作為一種實驗方法被廣泛適用于單克隆抗體的制備,膜蛋白的研究
逆轉錄的理論意義和實踐意義
(1)對分子生物學的中心法則進行了修正和補充。經典的中心法則認為:DNA的功能兼有遺傳信息的傳遞和表達,因此,DNA處于生命活動的中心位置。逆轉錄現象說明:至少在某些生物中,RNA同樣兼有遺傳信息傳遞和表達功能。修正后的中心法則表示為:是指遺傳信息從DNA傳遞給RNA,再從RNA傳遞給蛋白質,即完成
人工誘導同步化的過程和特點
細胞同步化可以通過人工誘導而獲得,即通過藥物誘導,使細胞同步化在細胞周期的某個特定時相。目前應用較廣泛的誘導同步化方法主要有兩種,即DNA合成阻斷法和分裂中期阻斷法。??DNA合成阻斷法指采用低毒或無毒的DNA合成抑制劑,將細胞抑制在DNA合成期,從而實現同步化。目前采用最多的DNA合成抑制劑為Td
?基因內轉換重排的特點和過程
基因內轉換重排可以反復出現,每出現一次就增加一段插入序列,所以這種錯位復性及修復方式在小衛星座位一般都是增加了重復單位數,如圖表示重復單位由原來的7個重復單位突變增加到9個重復單位。
什么是逆轉錄病毒?它有什么特點?
逆轉錄病毒(Retrovirus),又稱反轉錄病毒,屬于RNA病毒中的一類,它們的遺傳信息不是儲存在脫氧核糖核酸(DNA),而是儲存在核糖核酸(RNA)上。逆轉錄病毒基因組為二倍體,兩條相同的單股正鏈RNA,其兩端為長末端重復序列(LTR),內含有較強啟動子和增強子,對病毒DNA的轉錄調控具有重要作
頂體的結構特點和頂體反應的過程
頂體反應(acrosomal reaction)是指精子獲能后,在輸卵管壺腹部與卵相遇后,頂體開始產生的一系列改變;具體地說,就是精子釋放頂體酶,溶蝕放射冠和透明帶的過程。頂體(acrosome)是覆蓋于精子頭部細胞核前方、介于核與質膜間的囊狀細胞器,其本質是來源于高爾基體的特化的溶酶體,外包單層膜