3劑新冠重組RBD蛋白疫苗足以誘導產生高效體液免疫應答

　　新型冠狀病毒的爆發造成了全球醫療系統的重大危機，目前已經導致4億人的感染。包括滅活疫苗、重組疫苗、病毒載體疫苗和mRNA疫苗在內的多種疫苗，已經被作為降低病毒感染傳播和新冠肺炎發病的主要手段。通過免疫學原理評價疫苗誘導的長效免疫保護效果并確定合適的疫苗接種策略迫在眉睫。

　　2022年3月14日，中國科學技術大學李博峰教授和金騰川教授合作在Signal Transductionand Targeted Therapy 雜志（IF=18）在線發表題為"3-dose of RBDvaccine is sufficient to elicit a long-lasting memory response against SARS-CoV-2 infection" 的研究論文，該研究系統性分析了兩劑次、三劑次和四劑次重組RBD疫苗疊加免疫增強佐劑CpG的效果。結果顯示，對比兩劑次的疫苗接種，三劑次的疫苗接種能夠有效增強機體的體液免疫水平，表現為GC B細胞、TFH細胞、漿細胞和記憶性B細胞的比例和數量的增加，以及新冠特異性IgG抗體的高水平表達，而四劑次的該疫苗免疫效果與三劑次相類似。

　　在高等靈長類動物獼猴體內進行疫苗接種，發現在三劑次疫苗免疫后40周后再次給予第四劑次疫苗，RBD抗原成功刺激機體激活記憶性免疫應答，從而引發獼猴體內產生更多的新冠特異性抗體，且這些抗體具有很強的針對新冠病毒α、β、γ、δ乃至Omicron突變株的中和能力。這一研究將為臨床疫苗接種提供更好的理論依據。

　　目前，盡管全球的疫苗接種率不斷提高，新型冠狀病毒（SARS-CoV-2）引發的疫情危機在全球仍然不容樂觀，尤其伴隨著變異株的不斷出現，更是給全球防疫工作帶來了巨大挑戰。面對突變株的挑戰，接種疫苗加強針的呼聲越來越高，希望通過增加疫苗接種次數增強免疫保護效力，然而疫苗接種次數與誘導的免疫保護能力是否呈現正相關特性？至少幾劑次的重組疫苗接種才能誘導強效免疫保護和長期免疫記憶，實現長效的疫苗保護？誘導的免疫記憶應答在體內能持續多久？這些問題目前尚不清楚，是全球新冠疫苗接種實施過程中亟待解決的問題。

　　研究者系統地探究了新冠重組RBD蛋白疫苗（TLR9激動劑CpG和Al(OH)3作為佐劑在高低兩種接種劑量（0.5 μg or 5 μg RBD）和不同接種次數（2劑次、3劑次和4劑次）對C57BL/6小鼠免疫效果的影響。通過收集各免疫方案最后一劑次疫苗接種后14天的小鼠血清，研究團隊檢測RBD特異性IgG滴度和抗體的中和能力，結果顯示高劑量組均優于低劑量組，且只有接種3劑次和4劑次的5RCA (RBD+CpG+Al(OH)3)組的抗體中和能力顯著高于其他組。

　　研究團隊還通過流式細胞術檢測了脾臟、骨髓、肺臟等不同組織中免疫記憶相關的各細胞亞群，包括生發中心B細胞（GC B）、濾泡輔助T細胞（TFH）、漿母細胞、漿細胞、記憶性B細胞及活化的T細胞占比和絕對數目，發現3劑次和4劑次的5RCA組誘導免疫記憶反應的效果最佳。為了更直觀的比較不同疫苗接種方案誘導的免疫反應的差異，研究者將不加免疫佐劑的3劑次RBD組作為對照，對具有統計學上的顯著性差異的免疫指標記分為1，計算各組疫苗接種方案的總分，結果顯示2劑次疫苗免疫組中0.5RCA和5RCA的總分分別為1和3，而3劑次和4劑次疫苗免疫組總分均大于9，說明至少3劑次疫苗接種才能充分誘導高效免疫應答水平。值得指出的是，在這一評價體系中，4劑次疫苗接種組評分并未顯著優于3劑次疫苗接種組，提示3劑次疫苗接種如果能誘發機體建立強效的免疫保護和長期免疫記憶效能，則第四劑次的疫苗接種并非必要。

　　為了證實3劑次疫苗接種是否也能誘導高等靈長類動物產生高效的體液免疫保護效力和長期免疫記憶，研究者進一步檢測了獼猴在疫苗接種后不同時間點血清中RBD特異性IgG滴度和抗體中和能力以及外周血中記憶性B細胞比例，發現3劑次疫苗接種后2周猴RBD特異性IgG滴度和抗體中和能力達到峰值，隨后隨著時間延長緩慢下降，這一現象是符合體液應答規律的。更為有意義的是，研究者在第三劑次疫苗接種后40周，給予獼猴第4劑次疫苗接種，發現機體遭遇相同的抗原再次刺激時（模擬病毒感染），能迅速產生高水平中和抗體，并具有抑制SARS-CoV-2野生株和α、β、γ、δ突變株的能力，和一定程度抑制善于免疫逃逸的Omicron突變株的效果。

3劑次RBD疫苗能夠誘導和維持長效免疫應答（圖源自Signal Transductionand Targeted Therapy ）

　　綜上所述，該研究在小鼠和高等靈長類動物上系統性地探究了疫苗接種次數與機體體液免疫保護效力和長效免疫記憶之間的關系，證實2劑次新冠重組RBD蛋白疫苗對誘導小鼠強效免疫保護和長期免疫記憶效果不佳，3劑次佐劑增強型新冠重組RBD蛋白疫苗足以誘導強效免疫保護和長期免疫記憶，而4劑次疫苗接種后的免疫效果并不優于3劑次疫苗免疫。同時，3劑次新冠重組RBD蛋白疫苗誘導的免疫記憶保護在獼猴體內至少能持續10個月。本研究提示3劑次疫苗接種后機體若能建立長效免疫記憶，則更多劑次的疫苗接種并不必要，這一研究也為指導全球疫苗的接種策略提供有力支持。