聚合酶鏈式反應,又稱為PCR,是眾所周知的分子生物學技術之一,可以說占據了整個分子生物學領域的半壁江山。PCR技術除了廣泛應用于生命科學的基礎研究外,隨著近年來,以PCR為基礎的分子診斷技術在臨床診斷各種疾病的應用,提高了疾病的正確診斷率,給各種疾病的治療帶來了極大的便利,特別是在本次爆發的新冠病毒肺炎疫情中,更是體現了其舉足輕重的作用。
大體來說,PCR實驗主要包括三大主要的熱循環步驟:變性、退火、延伸。對于不同的實驗應用,PCR的設置可能做相應的調整,以獲得一些特殊的實驗結果,如產率提高,特異性增強或反應時間縮短等.
多年以來,PCR的基本原理一直未變,但隨著DNA聚合酶和試劑性能的大幅提升,以及其他相關材料的不斷創新,PCR實驗方法也在不斷改進。
我們之前對一部分PCR類型做了相關文章介紹,感興趣的同學可以點擊上方鏈接了解一下。今天小編為大家介紹一個PCR家族的新成員——快速PCR。首先看一下快速PCR家族第一位成員:染料法熒光定量PCR
快速染料法qPCR (SolisFAST? SolisGreen? qPCR Mix)
這款mix最大的特點是什么呢?快,快,快,既精確又快!
SolisFAST? SolisGreen? qPCR Mix是一款來自歐盟的專業PCR品牌SolisBiodyne,以其獨家的蛋白質穩定ZL技術為基礎,研發出極其穩定且可以快速定量的PCR Mixes,尤其是可以快速定量低濃度樣本;并且其可適用于市面上多種PCR熱循環儀。
該qPCR mix含有新型的硅修飾的DNA聚合酶,以及優化的快速熱啟動緩沖液和ZL的SolisGreen?染料 ,目前產品有兩種類型:含有陽性參照染料ROX,或者不含有ROX。
優勢大集錦
(一個集美貌與才華與一身的qPCR mix~·~)
2倍速定量目的基因(與標準染料法qPCR相比);
尤其適用于低濃度的樣本
更靈敏的DNA染料SolisGreen? dye
更精確定量
常溫運輸
兼容大部分的熱循環儀
30分鐘跑完qPCR!
圖1,對比常規qPCR mix 與SolisFAST? SolisGreen? qPCR Mix 在三種不同的PCR儀器上進行qPCR, SolisFAST? SolisGreen? qPCR Mix 可為您節約一半的時間。
精確而靈敏的基因定量
圖2,3. 75 bp大小的B2M基因片段的擴增。使用SolisFAST?SolisGreen?qPCR Mix稀釋人cDNA(100 ng–10 pg,每個濃度重復3次),在Mic qPCR循環儀(Bio Molecular Systems)上進行qPCR。 熱循環條件:先95°C 30秒,再95°C 5秒,60°C 20秒循環。