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  • 色譜法(chromatography)概念、特點和分類

    1903年,俄國科學家M.C.ЦВЕТ首創了一種綠葉中分離多種不同顏色色素成分的方法,命名為色譜法(chromatography),由于翻譯和習慣的原因,又常稱為層析法。近百年來,色譜法不斷發展,形式多種多樣。50年代開始,相繼出現了氣相色譜、液相色譜、高效液相色譜、薄層色譜、通透色譜、離子交換色譜、凝膠色譜、親和色譜、金屬螯合色譜等。幾乎每一種色譜法都已發展成為一門獨立的生化技術,在生化領域內得到了廣泛的應用。色譜技術因操作較簡便,設備不復雜,樣品量可大可小,既可用于實驗室的科學研究,又可用于工業化生產。它與光電儀器、電子計算機結合,可組成各種各樣的高效率、高靈敏度的自動化分離分析裝置。這充分顯示色譜技術的強大生命力,它是近代生物化學發展的關鍵技術之一。一、色譜法的概念和特點色譜法是利用混合物中各組分的理化性質的差異(吸附力、溶解度、分子形狀和大小、分子極性、分子親和力等),使各組分以不同程度分布在兩個相中,其中一個相叫固定相......閱讀全文

    常用色譜法介紹置換色譜法

    樣品加載到色譜柱上后,用含有一種比樣品組分保留作用更強的化合物(頂替劑或置換劑)的流動相洗脫,而將樣品組分置換流出色譜柱的分析方法。

    常用色譜法介紹-紙色譜法

    紙色譜法(filter paper chromatography)指的是把一種溶劑固定在固體的支持物(固定相) 上,由于濾紙纖維對水有較強的親和力,一般能吸附其自身質量22%的水,其中,6%的水以氫鍵與纖維素牢固結合,這些水即稱為固定相。被水飽和的有機相(如正丁醇乙醚水系統) 為流動相。當流動相從含

    常用色譜法介紹反相色譜法

    反相色譜法(英語:Reversed-phase chromatography,RPC)反相色譜法(IGC)一反普通氣相色譜的測定方式。以被測的高分子為固定相、以惰性氣體為流動相,為了測定需要,在流動相中加入一些探針分子,它們是揮發性的低分子。將探針分子注入氣化室氣化后,由載氣帶入色譜柱,測定它們在兩

    常用色譜法介紹親和色譜法

    親和色譜法( affinity chromatography),將相互間具有高度特異親和性的二種物質之一作為固定相,利用與固定相不同程度的親和性,使成分與雜質分離的色譜法。

    常用色譜法介紹電色譜法

    電色譜是化學學科的分析化學專業的色譜分析類中的一種新興分析技術。全稱為毛細管電色譜(Capillary Electrochromatography),簡稱CEC.公認的現代CEC的鼻祖是美國北卡大學的Jorgenson教授,其在20世紀80年代初期在美國分析化學雜志上發表了關于CEC的第一篇文章。在

    常用色譜法介紹薄層色譜法

    薄層色譜法(TLC),系將適宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或鋁基片上,成一均勻薄層。待點樣、展開后,根據比移值(Rf)與適宜的對照物按同法所得的色譜圖的比移值(Rf)作對比,用以進行藥品的鑒別、雜質檢查或含量測定的方法。薄層色譜法是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術,也用于跟蹤反應進程。

    常用色譜法介紹-離子色譜法

    離子色譜法(IC)是利用離子交換原理,連續對共存的多種陰離子或陽離子進行分離、定性和定量的方法。分析陽離子時,分離柱填充低容量的陽離子交換樹脂,用鹽酸溶液做淋洗液。

    比較液相色譜法中正相色譜法與反相色譜法的異同

    正相色譜:流動相極性小于固定相極性反相色譜:流動相極性大于固定相極性正相色譜用的固定相通常為硅膠,以及其他具有極性官能團,如胺基團和氰基團的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基或其他團的極性較強,因此,分離的次序是依據樣品中的各組份的極性大小,即極性強弱的組份最先被沖洗出色譜柱。正相色譜使用的流動相極性

    比較液相色譜法中正相色譜法與反相色譜法的異同

    正相色譜:流動相極性小于固定相極性反相色譜:流動相極性大于固定相極性正相色譜用的固定相通常為硅膠,以及其他具有極性官能團,如胺基團和氰基團的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基或其他團的極性較強,因此,分離的次序是依據樣品中的各組份的極性大小,即極性強弱的組份最先被沖洗出色譜柱。正相色譜使用的流動相極性

    常用色譜法介紹高效液相色譜法

    高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。高效液相色譜是色譜法的一個重要分支,以液體為流動相,采用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶

    常用色譜法介紹-膠束電動色譜法

    在背景電解質溶液中加入表面活性劑(如十二烷基硫酸鈉)形成膠束,根據樣品在膠束和周圍水性緩沖液中的分配系數及遷移率不同實現樣品分離的一種色譜法。

    常用色譜法介紹正相色譜法

    正相色譜法 根據流動相和固定相相對極性不同,液相色譜分為正相色譜和反相色譜。硅膠色譜和極性鍵合相色譜可作正相色譜。

    常用色譜法介紹氣相色譜法

    氣相色譜法是利用氣體作流動相的色層分離分析方法。汽化的試樣被載氣(流動相)帶入色譜柱中,柱中的固定相與試樣中各組份分子作用力不同,各組份從色譜柱中流出時間不同,組份彼此分離。采用適當的鑒別和記錄系統,制作標出各組份流出色譜柱的時間和濃度的色譜圖。根據圖中表明的出峰時間和順序,可對化合物進行定性分析;

    正相色譜法與反相色譜法比較

    (1)定義:正(反)相色譜法是流動相極性小(大)于固定相極性的液相色譜法。(2)固定相:正相色譜法使用極性固定相,如氰基、氨基鍵合相;反相色譜法使用非極性固定相,如C18、C8、苯基、二醇基鍵合相,或使用極性大的流動相,使用氰基、氨基鍵合相。(3)流動相:正相色譜法的流動相為烷基加適量極性調節劑;反

    薄層色譜法與液相色譜法的區別

    液相色譜法直接對試樣進行分析,主要是測定含量、測定雜質和有關物質。薄層色譜法需要與對照物作對比,雖然方法簡單但是準確度差,現在已經很少使用薄層色譜法,主要用于鑒定。液相色譜法是色譜法的一個重要分支,以液體為流動相,采用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有

    介紹液液分配色譜法的正相色譜法和反相色譜法

    ??? 高效液相色譜法按分離機制的不同分為液固吸附色譜法、液液分配色譜法(正相與反相)、離子交換色譜法、離子對色譜法及分子排阻色譜法。本文講的是液液分配色譜法的正相色譜法(NPC)和反相色譜法(RPC)。??? 使用將特定的液態物質涂于擔體表面,或化學鍵合于擔體表面而形成的固定相,分離原理是根據被分

    介紹液液分配色譜法的正相色譜法和反相色譜法

    ? 液相色譜法按分離機制的不同分為液固吸附色譜法、液液分配色譜法(正相與反相)、離子交換色譜法、離子對色譜法及分子排阻色譜法。本文講的是液液分配色譜法的正相色譜法(NPC)和反相色譜法(RPC)。??? 使用將特定的液態物質涂于擔體表面,或化學鍵合于擔體表面而形成的固定相,分離原理是根據被分離的組分

    薄層色譜法

    薄層色譜法 thin layer chromatography TLC 將吸附劑均勻地涂布在一塊玻璃板、塑料板或鋁箔上,形成厚度一般為0.25毫米的薄層作為固定相,以適當溶劑作為流動相(稱為展開劑),待分離的樣品溶液以斑點的形式點在薄板的一端,當薄板在密閉槽內進行展開時,由于各組分被展開劑載帶移動的

    催化色譜法

    催化色譜法 catalytic (gas) chromatography 是指以反應器作為色譜柱的一種氣相色譜法。用催化劑代替色譜柱中用于分離的固定相,以脈沖方式將反應物引入載氣流或直接以反應物作流動相,利用所得到的色譜圖對反應物和產物進行定性和定量分析,目的是研究催化反應的基元步驟、物質的吸附、催

    體積色譜法

    體積色譜法?volumetric chromatography 是以測量組分體積為定量依據的色譜方法。以二氧化碳為載氣,樣品經色譜柱分離之后,各組分隨載氣順序進入盛有50%氫氧化鉀溶液的帶刻度集氣量管,載氣二氧化碳被堿液完全吸收,載氣中各組分的氣體體積可在量管刻度上讀出,以此求出各組分的百分含量。體

    熱色譜法

    熱色譜法 chromatothermography 一種利用樣品中各組分吸附性能的差異,在色譜分離的同時進行熱脫附,以提高分離效率的吸附氣相色譜法。樣品由載氣帶入填充吸附劑的色譜柱內,同時借助外部加熱使色譜柱溫度沿軸向并順載氣方向有梯度變化 ,利用吸附劑的溫度分布對各組分的吸附容量的影響,選擇適宜的

    空穴色譜法

    ?空穴色譜法 vacancy chromatography 以被分析樣品或用載氣稀釋的樣品作為流動相,而把一定量的純載氣作為樣品注入色譜柱,在柱的出口進行檢測,可獲得一組分離后的色譜峰,這種方法稱為空穴色譜法。如果在空穴色譜法中所用的固定相和其它操作條件與普通氣相色譜法中所用條件完全一樣時,那么二者

    反相色譜法

    反相色譜法應用中性、非極性大孔的填充材料和極性流動相。分離基于被分析物質與固定相之間的相互作用,換句話說,也就是樣品的疏水性。

    吸附色譜法

    吸附色譜法是指利用吸附性的不同而進行的色譜分離和分析的方法,它是基于在溶質和用作固定固體吸附劑上的固定活性位點之間的相互作用來達到提取和分離的目的的。

    親和色譜法

    親和色譜法( affinity chromatography),將相互間具有高度特異親和性的二種物質之一作為固定相,利用與固定相不同程度的親和性,使成分與雜質分離的色譜法。

    紙色譜法

    實驗材料 待測樣品試劑、試劑盒 正丁醇三甲基吡啶二甲基吡啶苯甲醇水茚三酮硝酸銨顯色劑儀器、耗材 濾紙展開裝置展開劑鉛筆吹風機紫外分析儀玻璃毛細管微量移液管微量注射器

    親和色譜法

    一、基本理論(一)原理  在生物體內,許多大分子AKSJDHFKLSDFHKLSDJ具有與某些相對應的專一分子可逆結合的特性。例如抗原和抗體、酶和底物及輔酶、激素和受體、RNA和其互補的DNA等,都具有這種特性。生物分子之間這種特異的結合能力稱為親和力,根據生物分子間親和吸附和解離的原理,建立起來的

    色譜法總論

    1.色譜分析法:色譜法是一種分離分析方法,它利用樣品中各組分與流動相和固定相的作用力不同(吸附、分配、交換等性能上的差異),先將它們分離,后按一定順序檢測各組分及其含量的方法。2.色譜法的分離原理:當混合物隨流動相流經色譜柱時,就會與柱中固定相發生作用(溶解、吸附等),由于混合物中各組分物理化學性質

    薄層色譜法

      薄層色譜法,系將適宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或鋁基片上,成一均勻薄層。待點樣、展開后,與適宜的對照物按同法所得的色譜圖作對比,用以進行藥品的鑒別、雜質檢查或含量測定的方法。   1.儀器與材料   1.1 玻板 除另有規定外,用5cm×20cm,10cm×20cm或20cm×20cm的規

    薄層色譜法

    薄層色譜法 ?按各單體所規定的載體,放入適當容器,加入適量水以配成懸浮液,在厚度均勻一致的50×200mm或200×200mm平滑玻璃板上將此懸浮液均布成0.25mm的厚度,風干后一般在110度下干燥0.5-1h(或按單體規定)。 ?以離薄層板一端約25mm的位置作為點樣基線,用微量吸管按規定量

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