準備工作: DF12 加入0.1%BSA,100ml,取10ml冰浴,40ml放入孵箱;其余的放入4度; DNase I 100*; PI:50ug/ml; Hoechst33342: 1000ug/ml(all from Sigma) 計數板,冰盒;各種離心管,無菌流式管(BD),400濾網(BD) 染色方案: ① 細胞染色: 細胞消化計數,用DF12重懸,調整到1×106/ml濃度,分成三組2管; 37℃DF12洗滌,制備成單細胞懸液; 兩組均加入熒光染料Hoechst33342,使終濃度為6 ug/ml,其中CON組再加入維拉帕米,終濃度50 umol/......閱讀全文
這是我收集的SP分選的方法:與大家共享。 一 Hoechst染色方案 1. 在37℃循環水浴箱中預熱DMEM+培養基。確保溫度為37℃。 2. 重懸細胞于預熱的DMEM+培養基中,濃度為106/ml,為了避免細胞留在試管中,所以在Hoech