免疫熒光非特異性染色的消除方法（一）
一、非特異性染色的主要因素組織的非特異性染色的機理很復雜，其產生的原因主要可分為以下幾點：（1）一部分熒光素未與蛋白質結合，形成了聚合物和衍化物，而不能被透析除去。（2）抗體以外的血清蛋白與熒光素結合形成熒光素脲蛋白，可與組織成分結合。（3）除去檢查的抗原以外，組織中還可能存在類屬抗原（如Forssman氏抗原），可與組織中特異性抗原以外之之相應抗體結合。（4）從組織中難于提純抗原性物質，所以制備的免疫血清中往往混雜一些抗其他組織成分的抗體，以致容易混淆。（5）抗體分子上標記的熒光素分子太多，這種過量標記的抗體分子帶過多的陰離子，可吸附于正常組織上而呈現非特異性染色。（6）熒光素不純，標本固定不當等。二、消除非特異性染色的方法消除熒光抗體非特異性染色的方法應根據產生的原因采取適當的方法，常用的方法有以下幾種：（一）動物臟器粉末吸收法常用肝粉（豬、大白鼠或小白鼠），其次是骨髓粉、鼠腦粉和雞胚粉等。每毫升熒光抗體中加入肝粉50～10......閱讀全文
免疫熒光非特異性染色的消除方法
一、非特異性染色的主要因素 組織的非特異性染色的機理很復雜，其產生的原因主要可分為以下幾點： （1）一部分熒光素未與蛋白質結合，形成了聚合物和衍化物，而不能被透析除去。 （2）抗體以外的血清蛋白與熒光素結合形成熒光素脲蛋白，可與組織成分結合。 （3）除去檢查的抗原以外，組織中還可能存在類屬抗
免疫熒光非特異性染色的消除方法（二）
（二）透析法熒光素如FITC 分子可以通過半透膜，而蛋白質大分子不能透過，可將未與蛋白結合的熒光素透析除去。（1）將標記完畢的熒光蛋白液裝入一透析袋或玻璃紙袋內，液面稍留空隙，緊扎。（2）浸入0.02mol/L PH 7.1～7.4的PBS中（懸于大于標記物體積約50～100倍的PBS內），在4℃中
免疫熒光非特異性染色的消除方法（一）
一、非特異性染色的主要因素組織的非特異性染色的機理很復雜，其產生的原因主要可分為以下幾點：（1）一部分熒光素未與蛋白質結合，形成了聚合物和衍化物，而不能被透析除去。（2）抗體以外的血清蛋白與熒光素結合形成熒光素脲蛋白，可與組織成分結合。（3）除去檢查的抗原以外，組織中還可能存在類屬抗原（如Forss
免疫熒光非特異性染色的產生因素和消除方法
1、產生非特異性染色的主要因素（1）一部分熒光素未與蛋白質結合，形成了聚合物和衍化物，而不能被透析除去。（2）抗體以外的血清蛋白與熒光素結合形成熒光素脲蛋白，可與組織成分結合。（3）除去檢查的抗原以外，組織中還可能存在類屬抗原（如Forssman氏抗原），可與組織中特異性抗原以外之之相應抗體結合。（
非特異性酯酶染色
【臨床意義】 血細胞中所含酯酶各不一致，但皆系作用于短鏈脂肪酸的酯酶，統稱非特異性酯酶。其顯示方法是采用偶氮偶聯法。由于提供水解的基質不同，血細胞中常見酯酶有以下幾種： α-乙酸萘酚酯酶（α-naphthol acetate esterace,α-NAE) 乙酸AS-D萘酚酯酶（naphtho
非特異性酯酶染色實驗
實驗方法原理 NAE將α－乙酸萘酚水解，產生α－萘酚，再與重氮鹽偶聯，生成不溶性的有色沉淀位于胞質中。試劑、試劑盒 磷酸鹽緩沖液α－乙酸萘酚加重氮鹽甲基綠水港派實驗步驟 一、 實驗試劑：1. 作用液：l／20mol／L ?磷酸鹽緩沖液（PH7.4）40mg加10g／Lα－乙酸萘酚（以50％丙酮做溶劑
非特異性酯酶染色實驗
實驗方法原理NAE將α－乙酸萘酚水解，產生α－萘酚，再與重氮鹽偶聯，生成不溶性的有色沉淀位于胞質中。試劑、試劑盒磷酸鹽緩沖液α－乙酸萘酚加重氮鹽甲基綠水港派實驗步驟一、 實驗試劑：1. 作用液：l／20mol／L? 磷酸鹽緩沖液（PH7.4）40mg加10g／Lα－乙酸萘酚（以50％丙酮做溶劑）0.
ELISA試劑預防非特異性染色
非特異染色的原因包括一抗和二抗與血清蛋白的相互作用，抗體與組織之間的離子相互作用，以及與能夠影響IHC檢測系統的內源分子的相互作用。這些問題會產生高背景，以及無法在適當的細胞位置觀察目的抗原。這種類型的染色問題可通過用封閉劑來封閉非特異相互作用來解決。在將樣本與一抗共同孵育之前，可開展這些步驟：預防
最小化非特異性染色方法
Ⅰ、將經熒光標記的抗體進行稀釋。如果濃度過高，背景會因為的非特異性的相互作用的增加而增加。Ⅱ、在使用第一抗體之前，將樣品與過量的蛋白一起培育，如小牛血清蛋白（BSA），脫脂干奶酪，或來自于同一寄主的正常血清來作為標記的第二抗體。這個步驟通過阻斷第一抗體和細胞表面或胞內結構的非特異性的交互作用來降低背
非特異性染色產生原因及其解決方案
⑴游離熒光素殘留在二抗中。一部分熒光素未與蛋白質結合，形成了聚合物和衍化物，而不能被透析除去。二抗配置時用透析法或層析法分離熒光素標記的二抗和游離的二抗。購買高質量、高純度的熒光素二抗。⑵抗體以外的血清蛋白與熒光素結合形成熒光素脲蛋白，可與組織成分結合。⑶組織抗原封閉不全。除去檢查的抗原以外，組織中
免疫組化非特異性染色消除方法
一、非特異性染色的主要因素?組織的非特異性染色的機理很復雜，其產生的原因主要可分為以下幾點：?（1）一部分熒光素未與蛋白質結合，形成了聚合物和衍化物，而不能被透析除去。?（2）抗體以外的血清蛋白與熒光素結合形成熒光素脲蛋白，可與組織成分結合。?（3）除去檢查的抗原以外，組織中還可能存在類屬抗原（如F
免疫組化非特異性染色的消除方法
一、非特異性染色的主要因素?組織的非特異性染色的機理很復雜，其產生的原因主要可分為以下幾點：?（1）一部分熒光素未與蛋白質結合，形成了聚合物和衍化物，而不能被透析除去?。?（2）抗體以外的血清蛋白與熒光素結合形成熒光素脲蛋白，可與組織成分結合。?（3）除去檢查的抗原以外，組織中還可能存在類屬抗原（如
產生組織切片非特異性染色的原因有哪些？
1、抗體孵育時間過長、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是最重要的一條。 2、一抗用多克隆抗體易出現非特異性著色，建議試用單克隆抗體看看。 3、內源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高（含血細胞多的組織），需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃
如何最大限度地降低組織非特異性染色？
（1）縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是最重要的一條。（2）一抗用多克隆抗體易出現非特異性著色，建議試用單克隆抗體看看。（3）內源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高（含血細胞多的組織），需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色；（4）非特異性組分與抗體結合，這需要通過
產生組織切片非特異性染色的原因有哪些？
1、抗體孵育時間過長、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是最重要的一條。2、一抗用多克隆抗體易出現非特異性著色，建議試用單克隆抗體看看。3、內源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高（含血細胞多的組織），需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景
免疫組化非特異性染色及控制方法
一、非特異性染色的識別常出現在組織邊緣、膠原纖維及血漿滲出處，壞死組織及固定不良的組織中心處。表現為彌漫性，均勻性的背景染色。也可以是隨機分布的陽性反應產物點、團或塊狀。二、非特異性染色的原因1. Ig與Fc受體結合多見于冰凍切片（特別是淋巴造血組織，淋巴細胞，單核細胞，組織細胞表面多），主要是和二
免疫組化非特異性背景染色及其控制方法
一、非特異性染色的識別常出現在組織邊緣、膠原纖維及血漿滲出處，壞死組織及固定不良的組織中心處。表現為彌漫性，均勻性的背景染色。也可以是隨機分布的陽性反應產物點、團或塊狀。二、非特異性染色的原因1. Ig與Fc受體結合多見于冰凍切片（特別是淋巴造血組織，淋巴細胞，單核細胞，組織細胞表面多），主要是和二
氯化乙酸ASD萘本分酶與非特異性酯雙重染色
【臨床意義】 雙重染色優于單項染色。在雙重染色中首推AS-D-CE+NSE價值最大，能在同一涂片中精確在鑒定單核細胞和粒細胞。粒—單核細胞白血病（M4）中，可在同一涂片中有二群異常細胞，分別為AS-D-CE或NSE陽性，因此對急性粒—單核細胞白血病（M4）的細胞學鑒定和診斷具有一定價值。
免疫組化：非特異性染色的八大原因
免疫組化，免疫組織化學技術（immunohistochemistry），是一項利用抗原抗體反應，通過使標記抗體的顯色劑顯色來確定組織細胞內抗原，對蛋白定位，定性的實驗技術。非特異性染色的八大原因然而，結果卻未必都是那么如意的，常常出現下面這種狀況，好好的一張片子染得臟臟的，這就是最常見的非特異性染色
非特異性免疫的特點
抗病毒和抗細菌的非特異性免疫有許多相同之處，現將其特點給予補充。 巨噬細胞對阻止病毒感染和促進感染的恢復具有重要作用。血流中的單核細胞也能吞噬和清除病毒，中性粒細胞只能吞噬病毒，不能將其消滅，如果被吞噬的病毒不能消滅則可將病毒帶到全身，引起播散。正常人血清中含有能抑制病毒感染的物質，稱為病毒抑制物。
非特異性免疫的特點
①作用范圍廣。機體對入侵抗原物質的清除沒有特異的選擇性。 ②反應快。抗原物質一旦接觸機體，立即遭到機體的排斥和清除。 ③有相對的穩定性。既不受入侵抗原物質的影響，也不因入侵抗原物質的強弱或次數而有所增減。但是，當機體受到共同抗原或佐劑的作用時，也可增強免疫的能力。 ④有遺傳性。生物體出生后
非特異性免疫的功能
發揮保護功能的幾道屏障 首先是外圍屏障。皮膚粘膜是機體第一道防線，包括：皮膚粘膜的機械阻擋作用和附屬物（如纖毛）的清除作用；皮膚粘膜分泌物（如汗腺分泌的乳酸、胃粘膜分泌的胃酸等）的殺菌作用；體表和與外界相通的腔道中寄居的正常微生物叢對入侵微生物的拮抗作用等。其次是內部屏障。抗原物質一旦突破第一道
非特異性免疫的意義
非特異性免疫是特異性免疫的基礎，特異性免疫所產生的免疫物質又能增強非特異性免疫的作用。例如，巨噬細胞吞噬、加工、處理抗原物質，并把抗原傳遞給淋巴細胞，使其產生抗體或淋巴因子，加強殺傷靶細胞的能力。反過來，抗體和淋巴因子的產生也加強了巨噬細胞的趨化、活化和吞噬作用。因此，增強機體的非特異性免疫對提
非特異性免疫的分類
固有免疫（非特異性免疫）系統包括：組織屏障（皮膚和黏膜系統、血腦屏障、胎盤屏障等）；固有免疫細胞（吞噬細胞、殺傷細胞、樹突狀細胞等）；固有免疫分子（補體、細胞因子、酶類物質等）。
非特異性免疫的分類
固有免疫（非特異性免疫）系統分類 固有免疫（非特異性免疫）系統包括：組織屏障（皮膚和黏膜系統、血腦屏障、胎盤屏障等）；固有免疫細胞（吞噬細胞、殺傷細胞、樹突狀細胞等）；固有免疫分子（補體、細胞因子、酶類物質等）。
什么是非特異性免疫？
非特異性免疫（英文：nonspecific immunity）又稱先天免疫或固有免疫。它和特異性免疫一樣都是人類在漫長進化過程中獲得的一種遺傳特性。非特異性免疫是人一生下來就具有，而特異性免疫需要經歷一個過程才能獲得。炎癥反應是人一生下來就有的能力。 固有免疫對各種入侵的病原微生物能快速反應，同時在
非特異性抑制的概念
中文名稱非特異性抑制英文名稱non-specific inhibition定 義特指非特異性地對酶的抑制作用。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），酶（二級學科）
非特異性什么意思
用簡單的話說特異性就是有一定規律性，相對來說針對某地事物具有固定的特征。而非特異性就是不固定的，沒有特征性的。
LSCM免疫熒光染色
免疫熒光染色?使用預冷的?PBS?緩沖溶液洗滌細胞，去除殘留的培養液。立即加入?4%?多聚甲醛(PFA)固定液。在室溫固定15 min。用?PBS?洗滌殘留的固定液后，用?0. 5% Triton X-100?處理細胞?5 min，這樣可以通透細胞膜，使抗體等大分子能通過細胞膜，進到固定細胞的內部。
細胞免疫熒光染色
實驗概要細胞免疫熒光染色實驗原理利用抗原抗體反應，鑒定細胞是否表達某種蛋白。細胞經固定后，用特異性抗體（一抗）識別目的蛋白，再用一抗的抗體（二抗）識別一抗，二抗一般耦聯熒光基團或化學反應基團，通過熒光或化學發光顯示目的蛋白。主要試劑防淬滅劑、DPBS、指甲油、4% PFA、10 μg/mL PI、1