一步法RT_PCR詳細步驟
1.材料和方法Access RT-PCR System 試劑盒 (A1250):Promega 公司產品。500u AMV Rev 目的基因 se Transcriptase, 5u/ul500u Tfl DNA Polym 目的基因 ase, 5u/ul1 ml AMV/Tfl 5×Reaction Buff 目的基因1.25 ml MgSO4, 25 mM100ul dNTP Mixture, 10 mM each of dATP, dCTP, dGTP and dTTP50ul Positive Control RNA with Carri 目的基因 (1.25 attomole/ul)100ul Upstream Control Prim 目的基因, 15ulM100ul Downstream Control Prim 目的基因, 15uM13 ml Nuclease-F......閱讀全文
一步法RT_PCR詳細步驟
1.材料和方法Access RT-PCR?System?試劑盒 (A1250):Promega 公司產品。500u AMV Rev 目的基因?se Transcriptase, 5u/ul500u Tfl?DNA?Polym 目的基因 ase, 5u/ul1 ml AMV/Tfl 5×Reactio
萃取的詳細步驟
向待分離溶液(料液)中加入與之不相互溶解(至多是部分互溶)的萃取劑,形成共存的兩個液相。利用原溶劑與萃取劑對各組分的溶解度(包括經化學反應后的溶解)的差別,使它們不等同地分配在兩液相中,然后通過兩液相的分離,實現組分間的分離。如碘的水溶液用四氯化碳萃取,幾乎所有的碘都移到四氯化碳中,碘得以與大量的水
萃取的詳細步驟
向待分離溶液(料液)中加入與之不相互溶解(至多是部分互溶)的萃取劑,形成共存的兩個液相。利用原溶劑與萃取劑對各組分的溶解度(包括經化學反應后的溶解)的差別,使它們不等同地分配在兩液相中,然后通過兩液相的分離,實現組分間的分離。如碘的水溶液用四氯化碳萃取,幾乎所有的碘都移到四氯化碳中,碘得以與大量的水
萃取的詳細步驟?
向待分離溶液(料液)中加入與之不相互溶解(至多是部分互溶)的萃取劑,形成共存的兩個液相。利用原溶劑與萃取劑對各組分的溶解度(包括經化學反應后的溶解)的差別,使它們不等同地分配在兩液相中,然后通過兩液相的分離,實現組分間的分離。如碘的水溶液用四氯化碳萃取,幾乎所有的碘都移到四氯化碳中,碘得以與大量的水
pcr實驗詳細步驟
1、模板的取材主要依據PCR的壙增對象,可以是病原體標本如病毒、也可以是病理生理標本如細胞等。2、標本處理的基本要求是除去雜質,并部分純化標本中的核酸。多數樣品霓要經過SDS和蛋白 酶K處理。難以破碎的細菌,可用溶菌酶加EDTA處理。3、引物最好在模板cDNA的保守區內設計,引物長度一般在15~30
酸堿滴定實驗詳細步驟
酸堿滴定實驗詳細步驟:1、把已知物質的量濃度的鹽酸注入事先已用該鹽酸溶液潤洗過的酸式滴定管,至刻度“ 0”以上,把滴定管固定在滴定管夾上。輕輕轉動下面的活塞,使管的尖嘴部分充滿溶液且無氣泡。然后調整管內液面,使其保持在“0”或“0”以下的某一刻度,并記下準確讀數。2、把待測濃度的NaOH溶液注入事先
ph計校正詳細步驟
盡管pH計種類很多,但其校準方法均采用兩點校準法,即選擇兩種標準緩沖液:一種是pH7標準緩沖液。第二種是pH9標準緩沖液或pH4標準緩沖液。先用pH7標準緩沖液對電計進行定位,再根據待測溶液的酸堿性選擇第二種標準緩沖液。如果待測溶液呈酸性,則選用pH4標準緩沖液;如果待測溶液呈堿性,則選用pH9標準
疫共沉淀詳細步驟
實驗概要免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經典方法。是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。本實驗詳細介紹了免疫共沉淀的詳細步驟及注意事項。實驗原理當細胞在非變性條件下被裂解時,完整細胞內存在的許多蛋
酸堿滴定實驗詳細步驟
酸堿滴定實驗詳細步驟:1、把已知物質的量濃度的鹽酸注入事先已用該鹽酸溶液潤洗過的酸式滴定管,至刻度“ 0”以上,把滴定管固定在滴定管夾上。輕輕轉動下面的活塞,使管的尖嘴部分充滿溶液且無氣泡。然后調整管內液面,使其保持在“0”或“0”以下的某一刻度,并記下準確讀數。2、把待測濃度的NaOH溶液注入事先
免疫共沉淀詳細步驟
實驗概要免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經典方法。是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。本實驗詳細介紹了免疫共沉淀的詳細步驟及注意事項。實驗原理當細胞在非變性條件下被裂解時,完整細胞內存在的許多蛋
ph計校正詳細步驟
盡管pH計種類很多,但其校準方法均采用兩點校準法,即選擇兩種標準緩沖液:一種是pH7標準緩沖液。第二種是pH9標準緩沖液或pH4標準緩沖液。先用pH7標準緩沖液對電計進行定位,再根據待測溶液的酸堿性選擇第二種標準緩沖液。如果待測溶液呈酸性,則選用pH4標準緩沖液;如果待測溶液呈堿性,則選用pH9標準
ph計校正詳細步驟
盡管pH計種類很多,但其校準方法均采用兩點校準法,即選擇兩種標準緩沖液:一種是pH7標準緩沖液。第二種是pH9標準緩沖液或pH4標準緩沖液。先用pH7標準緩沖液對電計進行定位,再根據待測溶液的酸堿性選擇第二種標準緩沖液。如果待測溶液呈酸性,則選用pH4標準緩沖液;如果待測溶液呈堿性,則選用pH9標準
酸堿滴定實驗詳細步驟
酸堿滴定實驗詳細步驟:1、把已知物質的量濃度的鹽酸注入事先已用該鹽酸溶液潤洗過的酸式滴定管,至刻度“ 0”以上,把滴定管固定在滴定管夾上。輕輕轉動下面的活塞,使管的尖嘴部分充滿溶液且無氣泡。然后調整管內液面,使其保持在“0”或“0”以下的某一刻度,并記下準確讀數。2、把待測濃度的NaOH溶液注入事先
ph計校正詳細步驟
盡管pH計種類很多,但其校準方法均采用兩點校準法,即選擇兩種標準緩沖液:一種是pH7標準緩沖液。第二種是pH9標準緩沖液或pH4標準緩沖液。先用pH7標準緩沖液對電計進行定位,再根據待測溶液的酸堿性選擇第二種標準緩沖液。如果待測溶液呈酸性,則選用pH4標準緩沖液;如果待測溶液呈堿性,則選用pH9標準
dot-blot的詳細步驟
蛋白質印跡法(免疫印跡試驗)即Western Blot。它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法。其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組織中表達情況的信息。
測氨氮詳細步驟-來了
氨氮是指水中以游離氨(NH3)和銨離子(NH4+)形式存在的氮。自然地表水體和地下水體中主要以硝酸鹽氮(NO3)為主,以游離氨(NH3)和銨離子(NH4+)形式存在的氮受污染水體的氨氮 叫水合氨,也稱非離子氨。 氨氮檢測方法,通常有納氏比色法、苯酚-次氯酸鹽(或水楊酸-次氯酸鹽)比色法和電極法
色差儀的詳細操作步驟
色差儀的詳細操作步驟色差儀,廣泛應用于塑膠、印刷、油漆油墨、紡織、印染服裝等行業的顏色管理領域,根據CIE色空間的Lab,Lch原理,測量顯示出樣品與被測樣品的色差△E以及 △Lab值。適合企業內、外部色彩評價和數據管控。操作步驟1、安置好白板,按下電源開關鍵,出現開機動畫,正在進行自動黑白板校正。
吊鉤稱稱量測試詳細步驟
吊鉤稱,無線電子吊秤,耐高溫吊秤,電子吊鉤秤,防爆吊秤,吊磅稱量測試詳細步驟如下:1、確定自動置零和零點跟蹤裝置的狀態,并在對應的方框內劃×記錄。2、確定出本次試驗中選定的至少10個不同載荷值。3、進行預加載荷。4、記錄施加、環境溫度和濕度。5、求出零點或接近零點(10d)的誤差。6、加放砝碼,從小
RNA干擾的詳細實驗步驟
步驟包括:(一)siRNA的設計1. 在設計RNAi實驗時,可以先在以下網站進行目標序列的篩選:GenesilAmbion2. RNAi目標序列的選取原則:(1)從轉錄本(mRNA)的AUG起始密碼開始,尋找“AA”二連序列,并記下其3'端的19個堿基序列,作為潛在的siRNA靶位點。有研究
TRIZOL提取RNA的詳細步驟
1、在提取組織RNA時,每50~100mg組織用1ml Trizol試劑對組織進行裂解;提取細胞RNA時,先離心沉淀細胞,每5-10╳106個細胞加1ml Trizol后,反復用槍吹打或劇烈振蕩以裂解細胞。2、將組織或細胞的Trizol裂解液轉入EP管中,在室溫15~30C下放置5分鐘;在EP管中,
雙位點一步法的操作步驟
在雙抗體夾心法測定抗原時,如應用針對抗原分子上兩個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標抗體,則在測定時可使標本的加入和酶標抗體的加入兩步并作一步。這種雙位點一步不但簡化了操作,縮短了反應時間,如應用高親和力的單克隆抗體,測定的敏感性和特異性也顯著提高。單克隆抗體的應用使測定抗原的ELIS
電子天平檢查步驟詳細圖解
電子天平是實驗室使用最普遍的基礎設備之一,而稱量結果作為基礎實驗數據又至關重要,確保電子天平的測量準確性成為必然。處于法制監管下的實驗室電子天平每年都必須到法定計量機構進行計量檢定,但對于數據有較高要求的實驗室,在計量檢定的間隔周期內為了確保量值準確,仍需要根據實驗室和設備的狀況進行有效的自己檢查。
微波消解儀的詳細操作步驟
稱取0.2克-1.0克的試樣置于微波消解儀的消解罐中,加入約2mI的水,加人適量的酸。通常是選用HNO3、HCI、HF、H2O2等,把罐蓋好,放入爐中。當微波通過試樣時,極性分子隨微波頻率快速變換取向,2450MHz的微波,分子每秒鐘變換方向2.45×109次,分子來回轉動,與周圍分子相互碰撞摩擦,
凱氏定氮法-詳細步驟
根據凱氏定氮原理測定需要三個步驟,即消解、蒸餾、滴定。化學方程式有:[1].(NH4)2SO4+2NaOH高溫蒸氣Na2SO4+2H2O+2NH3↑[2].NH3+H3BO3→NH4H2BO3
qpcr標準品的詳細制備步驟
步驟如下:?(1)利用QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit試劑盒提取cfDNA,cfDNA的長度為160-200bp,濃度為0.3-1ngul;?(2)利用步驟(1)得到的cfDNA構建濃度為100-150ngul的cfDNA文庫;?(3)對步驟(2)得到的cfDN
雙位點一步法的原理和操作步驟
在雙抗體夾心法測定抗原時,如應用針對抗原分子上兩個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標抗體,則在測定時可使標本的加入和酶標抗體的加入兩步并作一步。這種雙位點一步不但簡化了操作,縮短了反應時間,如應用高親和力的單克隆抗體,測定的敏感性和特異性也顯著提高。單克隆抗體的應用使測定抗原的ELIS
細胞免疫熒光的詳細操作步驟
細胞免疫熒光的詳細操作步驟1,取出細胞爬片放到35mm或60mm用過的細胞培養皿里,PBS洗三遍。注意有的時候作的細胞爬片可能比較小,因此夾取的時候要小心。2,4%多聚甲醛固定20分鐘,PBS洗三遍。3,0.2%Triton X 100通透10分鐘,PBS洗三遍。4, 與二抗相同宿主的血清封閉30分
細胞免疫熒光的詳細操作步驟
細胞免疫熒光的詳細操作步驟1,取出細胞爬片放到35mm或60mm用過的細胞培養皿里,PBS洗三遍。注意有的時候作的細胞爬片可能比較小,因此夾取的時候要小心。2,4%多聚甲醛固定20分鐘,PBS洗三遍。3,0.2%Triton X 100通透10分鐘,PBS洗三遍。4, 與二抗相同宿主的血清封閉30分
微水測量儀的詳細使用步驟
在工作中,微量水分測量儀是一款比較常見的高壓電力試驗設備,電力工作者在工作中經常需要用到,那么如何用好該設備呢?本文來為大家簡單介紹。一、連接SF6設備。將測量管道上螺紋端與開關接頭連接好,用扳手擰緊,關閉測量管道上另一端的針型閥;再把測試管道上的快速接頭一端插入SF6微量水分測量儀上的采樣口;將排
pcr實驗詳細步驟是怎么樣的
1、模板的取材主要依據PCR的壙增對象,可以是病原體標本如病毒、也可以是病理生理標本如細胞等。2、標本處理的基本要求是除去雜質,并部分純化標本中的核酸。多數樣品霓要經過SDS和蛋白 酶K處理。難以破碎的細菌,可用溶菌酶加EDTA處理。3、引物最好在模板cDNA的保守區內設計,引物長度一般在15~30