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    聚合酶鏈式反應(PCR)擴增和擴增產物克隆

    PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶鏈反應)是一種選擇性體外擴增DNA或RNA的方法.它包括三個基本步驟:(1) 變性(Denature):目的雙鏈DNA片段在94℃下解鏈;(2) 退火(Anneal):兩種寡核苷酸引物在適當溫度(50℃左右)下與模板上的目的序列通過氫鍵配對;(3) 延伸(Extension):在Taq DNA聚合酶合成DNA的zui適溫度下,以目的DNA為模板進行合成。由這三個基本步驟組成一輪循環,理論上每一輪循環將使目的DNA擴增一倍,這些經合成產生的DNA又可作為下一輪循環的模板,所以經25-35輪循環就可使DNA擴增達106 倍。一、 PCR反應中的主要成份1、引物:PCR反應產物的特異性由一對上下游引物所決定。引物的好壞往往是PCR成敗的關鍵。引物設計和選擇目的DNA序列區域時可遵循下列原則:(1) 引物長度約為16-30bp, 太短會降低退火溫度影......閱讀全文

    什么是PCR?

     定義  聚合酶鏈式反應簡稱PCR(英文全稱:Polymerase Chain Reaction),  聚合酶鏈式反應具體內容點擊: 聚合酶鏈式反應,簡稱PCR。聚合酶鏈式反應,其英文Polymease Chain Reaction(PCR)是體外酶促合成特異

    PCR技術 PCR技術的應用

    一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合

    分子生物學常用實驗技術(page 2)

    一、RNA 制備   模板mRNA 的質量直接影響到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的結構特點,容易受RNA 酶的攻擊反應而降解,加上RNA 酶極為穩定且廣泛存在,因而在提取過程中要嚴格防止RNA 酶的污染,并設法抑制其活性,這是本實驗成敗的關鍵。所有的組織中均存在RNA 酶,人

    基因克隆技術

    一、目的基因的獲得 目的基因是指所要研究或應用的基因,也就是將要克隆或表達的基因。獲得目的基因是分子克隆過程中最重要的一步。目前用于獲得目的基因的方法有幾種,如限制性內切酶直接分離法、文庫篩選法、體外擴增法和人工合成法等,其中限制性內切酶法直接分離目的基因和多聚酶鏈式反應(PCR)或逆轉錄-

    基因克隆技術

    一、目的基因的獲得目的基因是指所要研究或應用的基因,也就是將要克隆或表達的基因。獲得目的基因是分子克隆過程中最重要的一步。目前用于獲得目的基因的方法有幾種,如限制性內切酶直接分離法、文庫篩選法、體外擴增法和人工合成法等,其中限制性內切酶法直接分離目的基因和多聚酶鏈式反應(PCR)或逆轉錄-多聚酶鏈式

    分子實驗方法8:聚合酶鏈式反應(PCR)擴增和擴增產物克隆

    第八章 聚合酶鏈式反應(PCR)擴增和擴增產物克隆第一節 概 述  PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶鏈反應)是一種選擇性體外擴增DNA或RNA的方法.它包括三個基本步驟: (1) 變性(Denature):目的雙鏈DNA片段在94℃下解鏈; (2) 退火(Annea

    多聚酶鏈式反應技術(PCR技術)

    多聚酶鏈式反應即PCR(polymerase chain reaction)技術,應用這一技術可以將微量目的基因(DNA片段)擴增一百萬倍以上。PCR反應理論的提出和技術的完善對于分子生物學的發展具有特殊的意義,它以敏感度高、特異性強、產率高、重復性好以及快速簡便等優點迅速成為分子生物學研究中應用最

    多聚酶鏈式反應技術(PCR技術)

    多聚酶鏈式反應即PCR(polymerase chain reaction)技術,應用這一技術可以將微量目的基因(DNA片段)擴增一百萬倍以上。PCR反應理論的提出和技術的完善對于分子生物學的發展具有特殊的意義,它以敏感度高、特異性強、產率高、重復性好以及快速簡便等優點迅速成為分子生物學研究中應用最

    聚合酶鏈反應(PCR)技術的發展和應用-1

    第一節 概述  聚合酶鏈反應或多聚酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction, PCR),又稱無細胞克隆技術(“free bacteria”cloning technique),是一種對特定的DNA片段在體外進行快速擴增的新方法。該方法一改傳統分子克隆技術的模式,不通過活細胞,操作

    PCR技術綜述

    前言      一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Po

    PCR簡介及污染的處理

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    分子標記

    內容:一、遺傳標記 二、DNA分子標記 三、染色體原位雜交 四、DNA分子標記的應用 長期以來,植物育種中選擇都是基于植株的表型性狀進行的,當性狀的遺傳基礎較為簡單或即使較為復雜但表現加性基因遺傳效應時,表型選擇是有效的。但水稻的許多重要農藝性狀為數量性狀,如

    逆轉錄PCR(RT-PCR)

    實驗四 逆轉錄PCR (RT-PCR )【實驗目的】1.了解用逆轉錄PCR 法獲取目的基因的原理。2.學習和掌握逆轉錄PCR 的技術和方法。【實驗原理】聚合酶鏈式反應(PCR)過程利用模板變性,引物退火和引物延伸的多個循環來擴增DNA序列。因為上一輪的擴增產物

    PCR技術

       PCR技術www.runwelltac.comPCR技術的基本原理與操作流程聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法,為zui常用的分子生物學技術之一。典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模

    聚合酶鏈式反應(PCR)

    實驗概要聚合酶鏈式反應(Polymerase  Chain  Reaction,PCR)是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法,為最常用的分子生物學技術之一。典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應組成一個循環,通過多次循環反應,使目的

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    RAPD(隨機擴增多態性DNA)分析技術

    聚合酶鏈式反應(PCR)以其優越性極大地影響到了分子生物學的幾乎所有領域,并以其基本程序和DGGE,開發出多種檢測核苷酸變異的方法。RAPD(Random Amplifed Polymorphic DNA)是其中一種,可用于(1)遺傳圖譜的構建(2)系統學研究(3)目的基因的標記和定位(4)純度和外

    PCR引物設計及評價實驗

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    實驗方法原理聚合梅鏈式反應(polymerase chain reaction)即PCR技術,是一種在體外快速擴增特定基因或DNA 序列的方法,故又稱基因的體外擴增法。PCR技術已成為分子生物學研究中使用最多,最廣泛的手段之一,而引物設計是PCR技術中至關重要的一環,使用不合適的PCR引物容易導致實

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    PCR技術

    1 導論 多聚酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction, PCR)是美國Perkin-Elmer/Cetus公司人類遺傳研究室Mullis K. B.等人于1985年發明的一種快速體外DNA片段擴增技術,是八十年代分子生物學資源領域的一項革命性突破,被譽為分子生物學資

    PCR實驗技術

                                    PCR實驗技術 PCR(聚合酶鏈式反應) 【原理】&nb

    PCR技術概述

    聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)技術是基因擴增技術的一次重大革新,是分子生物學發展史中的一個重要里程碑。使用PCR擴增技術,可以將極微量的靶DNA片段特異地擴增上百萬倍,大大提高了對DNA分子的分析和檢測能力。PCR技術具有敏感度高、特異性強、快速簡便等優

    聚合酶鏈式反應(PCR)技術概述

    聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)技術是基因擴增技術的一次重大革新,是分子生物學發展史中的一個重要里程碑。使用PCR擴增技術,可以將極微量的靶DNA片段特異地擴增上百萬倍,大大提高了對DNA分子的分析和檢測能力。PCR技術具有敏感度高、特異性強、快速簡便等優

    PCR快速檢測技術及其在食品中的應用

       [摘 要] 微生物食品安全是當前消費者與食品工業共同關注的話題,食品中致病菌的快速、準確、簡便檢測,對于食品安全質量控制以及食品鏈中致病性細菌的溯源追蹤具有重要作用。在選用微生物的快速檢測方法時,應該考慮到方法的預期目標的精確性、檢測時間、經濟性、可接受性、操作簡便性、技術服務等因素。介紹了P

    PCR擴增分離目的DNA片段實驗原理、材料和步驟(一)

    一、目的了解多聚合酶鏈反應DNA 擴增技術的基本原理和實驗應用,掌握PCR反應基本技術。二、原理PCR(Polymerase Chain Reaction)即聚合酶鏈式反應是1986 年由Kallis Mullis發現。這項技術已廣泛地應用于分子生物學各個領域,它不僅可用于基因分離克隆和核酸

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