【實驗原理】 外源DNA與載體分子的連接就是DNA重組,這樣重新組合的DNA叫做重組體或重組子。重組的DNA分子是在DNA 連接酶的作用下,有Mg2+ 、ATP存在的連接緩沖系統中,將載體分子與外源DNA分子進行連接。Taq DNA聚合酶擴增的PCR產物,其DNA雙鏈前后末端都有一個游離的A堿基,可以與pMD18-T Vector 末端游離的T堿基互補形成環狀重組T質粒。將攜帶目的基因的T質粒轉入大腸桿菌并對其進行藍白斑篩選鑒定,挑選出所需的重組質粒。 【實驗器材】 F 試劑耗材:Taq DNA聚合酶、安芐青霉素、葡萄糖、X-gal、IPTG、pMD18-T載體、LB培養基、培養皿、涂玻棒、移液槍、槍頭、1.5ml離心管、PCR 管、溶液I、溶液II、溶液III、苯酚、三氯甲烷、95%乙醇、無水乙醇、RNAase A、DNA Marker。 F 儀器:PCR儀、恒溫培養......閱讀全文
實驗概要本實驗介紹了線蟲unc-22突變基因的克隆實驗原理和操作步驟。實驗原理外源DNA與載體分子的連接就是DNA重組,這樣重新組合的DNA叫做重組體或重組子。重組的DNA分子是在DNA 連接酶的作用下,有Mg2 、ATP存在的連接緩沖系統中,將載體分子與外源DNA分子進行連接。Taq