MTT實驗的一些細節問題
一、細胞： 1.選擇適當的細胞接種濃度。一般情況下，96孔培養板的一內貼壁細胞長滿時約有105個細胞。但由于不同細胞貼壁后面積差異很大，因此，在進行MTT試驗前，要進行預實驗檢測其貼壁率、倍增時間以及不同接種細胞數條件下的生長曲線，確定試驗中每孔的接種細胞數和培養時間，以保證培養終止致細胞過滿。這樣，才能保證MTT結晶形成酌量與細胞數呈的線性關系。否則細胞數太多敏感性降低，太少觀察不到差異。 2.藥物濃度的設定。一定要多看文獻，參考別人的結果再定個比較大的范圍先初篩。根據自己初篩的結果縮小濃度和時間范圍再細篩。切記！否則，可能你用的時間和濃度根本不是藥物的有效濃度和時間。 3. 時間點的設定。在不同時間點的測定OD值，輸入excel表，最后得到不同時間點的抑制率變化情況，畫出變化的曲線，曲線什么時候變得平坦了（到了平臺期）那個時間點應該就是最好的時間點（因為這個時候的細胞增殖抑制表現的最明顯）。 4.培養時間。200 ul的培養......閱讀全文
MTT實驗心得
MTT實驗是檢測細胞活力的實驗方法，由于細胞活力與細胞數呈正相關，因此也常常用來檢測細胞的增殖情況。MTT的原理：活細胞有琥珀酸脫氫酶，將MTT還原成棕褐色沉淀。由于一般介紹園子里已經很多，筆者將自己的心得按照實驗流程與大家交流交流。1、培養好細胞點板。養細胞沒啥好說的，如果不知道細胞如何養，那就看
MTT分析實驗
實驗概要本實驗介紹了一種檢測細胞存活和生長的方法- MTT分析實驗。實驗原理MTT是一種粉末狀化學試劑，全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo ?(-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide，漢語化學名為 ?3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二
四唑鹽（MTT）比色實驗——MTT法
實驗方法原理活細胞的線粒體中的琥珀脫氫酶能使外源性的MTT還原為難溶性的藍紫色結晶物并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。二甲基亞砜能溶解細胞中的紫色結晶物，用酶聯免疫檢測儀在490? nm 波長處測定其光吸收值，可間接反映細胞數量。在一定細胞數范圍內，MTT結晶物形成的量與細胞數成正比。?實驗材料細胞
MTT法實驗原理
原理：活細胞中脫氫酶能將四唑鹽還原成不溶于水的藍紫色產物甲臜，并沉淀在細胞中，而死細胞沒有這種功能。DMSO能溶解沉積在細胞中藍紫色結晶物，溶液顏色深淺與所含的formazan量成正比。再用酶標儀測定OD值。
MTT法實驗步驟
貼壁細胞1、收集對數期細胞，調整細胞懸液濃度，每孔加入100ul,鋪板使待測細胞調密度至1000-10000孔，（邊緣孔用無菌PBS填充）。2.、5%CO2，37℃孵育，至細胞單層鋪滿孔底（96孔平底板）,加入濃度梯度的藥物,原則上，細胞貼壁后即可加藥，或兩小時，或半天時間，但我們常在前一天下午鋪板
關于MTT實驗總結
MTT分析法以活細胞代謝物還原劑3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide, MTT噻唑藍為基礎。MTT為黃色化合物，是一種接受氫離子的染料，可作用于活細胞線粒體中的呼吸鏈，在琥珀酸脫氫酶和細胞色素C的作用下tet
MTT法實驗原理
原理：活細胞中脫氫酶能將四唑鹽還原成不溶于水的藍紫色產物甲臜，并沉淀在細胞中，而死細胞沒有這種功能。DMSO能溶解沉積在細胞中藍紫色結晶物，溶液顏色深淺與所含的formazan量成正比。再用酶標儀測定OD值。
MTT實驗原理和實驗步驟
MTT原理：MTT全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide，是一種黃顏色的染料。活細胞線粒體中琥珀酸脫氫酶能夠代謝還原MTT，同時在細胞色素C的作用下，生成藍色（或藍紫色）不溶于水的甲臜（Formaza
MTT法實驗原理與MTT 溶液的配制方法
原理：活細胞中脫氫酶能將四唑鹽還原成不溶于水的藍紫色產物甲臜，并沉淀在細胞中，而死細胞沒有這種功能。DMSO能溶解沉積在細胞中藍紫色結晶物，溶液顏色深淺與所含的formazan量成正比。再用酶標儀測定OD值。
MTT法實驗原理與MTT 溶液的配制方法
通常，此法中的mtt濃度為5mg/ml。因此，可以稱取mtt0.5克，溶于100ml的磷酸緩沖液(pbs)或無酚紅的培養基中，用0.22μm濾膜過濾以除去溶液里的細菌，放4℃避光保存即可。在配制和保存的過程中，容器最好用鋁箔紙包住。需要注意的是，mtt法只能用來檢測細胞相對數和相對活力，但不能測定細