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  • 發布時間:2022-02-07 15:34 原文鏈接: 6孔板中致病菌粘附細胞培養會污染細胞培養箱么

    6孔板中致病菌粘附細胞培養會污染細胞培養箱
    細胞培養最關鍵的還是操作,如果操作規范的話,污染幾率是很小的,如果在培養的時候總是有黑色點狀物質,可以考慮是不是細胞碎片或者血清里的蛋白質沉淀。

    細胞污染可能原因:
    1.天氣太熱,實驗者在培養和接種或者換液時出汗(有空調稍好,但是手也出汗)。
    2.培養間里可能暗藏污染原。
    3.注意培養箱(這點最重要),仔細檢查培養箱里的隔板的下面,有可能有霉菌斑。(我以前遇到過)
    4.培養基污染多數是配置過程中造成的,仔細檢查配置過程用到的器具。
    5.血清過期一個月,如果保存的好應該沒有問題,但是保存不好,新來的血清,用一次就可能污染。血清過期和污染是否有必然的聯系不好說,我們覺得聯系不大。

    解決辦法:
    1.徹底清潔培養間,顯微鏡室。然后,紫外燈多照射一端時間消毒空氣。
    2.徹底清潔培養箱:(1)每個隔板仔細清洗,火烤。(2)培養箱大換水,換成新鮮干凈的蒸餾水。(3)培養箱內壁用酒精棉球或者稀過氧乙酸認真擦洗。(4)紫外燈長時間照射(一天)。
    3.實驗用器械消毒:注意消毒時間和壓力,有必要檢查壓力鍋和校正壓力表是否準確。
    4.一次性手套在打開使用前一天放入無菌間照射消毒。
    5.如果用雙抗,應該現用現配。
    6.注意過濾器的消毒滅菌。
    7.經驗告訴我們過期1年內的血清,只要保存妥當,其實血清的效價是不會降低的;還有剛購買的大規格的血清收到后,避免反復凍融,血清分裝的時候要無菌分裝,轉入無菌間,在超凈臺內將血清分裝入50-100ml血清瓶中封口,并于-20℃保存備用。分裝時注意:① 預先要將血清輕輕搖動數周、混勻;② 用吸液管吹出血清時要注意:③ 不要吹出氣泡,血清很粘稠,很容易產生氣泡。如果產生氣泡,則在酒精燈火焰上過一下。
    8.檢查培養間和超凈臺的通風過濾網,如果臟了,需要更換。

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