免疫分析中常用封閉劑介紹及選擇
在免疫學實驗中,通常使用封閉劑來減少非特異性結合。常用的封閉劑有脫脂奶粉,BSA,血清以及 Fab 片段單鏈二抗等。根據不同的平臺選擇相應的封閉劑。脫脂奶粉作用原理:脫脂奶粉含有多種蛋白,可以封閉未吸附蛋白的固相載體(WB 膜、ELISA 板等)位點,減少抗體與之結合的概率,避免非特異性結合帶來的高背景。優點:價格便宜,因含多種不同分子量的蛋白,故封閉起來更全面。缺點:成分復雜,適用范圍窄。不適用于生物素和堿性磷酸酶標記的抗體系統。且封閉后的載體不易長期保存,因此在試劑盒的生產中較少應用。牛血清白蛋白BSA作用原理:同脫脂奶粉,封閉未吸附蛋白的固相載體位點。優點:成分單一,適用于 ELISA 實驗,生物素、堿性磷酸酶系統的免疫學檢測實驗或者其他對特異性要求較高的實驗。缺點:大部分 BSA 中有少量的抗體殘留,會導致抗原/抗體之間的交叉反應,造成一定背景。動物血清作用原理:1、待檢樣本會有些與蛋白非特異性結合的......閱讀全文
免疫分析中常用封閉劑介紹及選擇
在免疫學實驗中,通常使用封閉劑來減少非特異性結合。常用的封閉劑有脫脂奶粉,BSA,血清以及 Fab 片段單鏈二抗等。根據不同的平臺選擇相應的封閉劑。脫脂奶粉作用原理:脫脂奶粉含有多種蛋白,可以封閉未吸附蛋白的固相載體(WB?膜、ELISA?板等)位點,減少抗體與之結合的概率,避免非特異性結合帶來的高
免疫組化試驗抗體選擇及常用染色方法
一、免疫組織化學(Immunohistochemistry,IHC)免疫組織化學是利用抗原抗體的特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑 (熒光素、酶、金屬離子、同位素) 顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究。免疫組織化學染色技術不僅有較高的敏感性
免疫資料——免疫學常用簡稱介紹
1:抗體查詢常用名詞 Reactivity (物種與抗體反應):Species with which the antibody reacts Host Species (宿主):Host in which the antibody was generated Applicati
免疫資料——免疫學常用簡稱介紹
1:抗體查詢常用名詞Reactivity?(物種與抗體反應):Species?with?which?the?antibody?reactsHost?Species?(宿主):Host?in?which?the?antibody?was?generatedApplications(應用)?:Speci
放射免疫分析常用方法
放射免疫分析常用的有液相法和固相法兩種:(1)液相法:將待檢標本(例如含胰島素抗原)與定時的同位素標記的胰島素(抗原)和定時的抗胰島素抗體混合,經一定作用時間后,分離收集抗原抗體復合物及游離的抗原,測定這兩部分的放射活性,計算結合率。在反應系統中,待檢標本的胰島素抗原與同位素標記的胰島素競爭奪戰
水質分析中的常用指標
1、有機化學指標溶解氧 (Dissolved oxygen簡稱DO)指溶解在水中的分子態氧(O2),簡稱DO)。水中溶解氧的含量與大氣壓、水溫及含鹽量等因素有關。大氣壓力下降、水溫升高、含鹽量增加,都會導致溶解氧含量減低。化學需氧量(Chemical oxygen demand 簡稱COD)化學需氧
水質分析中的常用指標
1、有機化學指標溶解氧 (Dissolved oxygen簡稱DO)指溶解在水中的分子態氧(O2),簡稱DO)。水中溶解氧的含量與大氣壓、水溫及含鹽量等因素有關。大氣壓力下降、水溫升高、含鹽量增加,都會導致溶解氧含量減低。?一般清潔的河流,DO可接近其溫度的飽和值,當有大量藻類繁殖時,溶解氧可能過飽
放射免疫分析的常用方法
放射免疫分析常用的有液相法和固相法兩種: (1)液相法: 將待檢標本(例如含胰島素抗原)與定時的同位素標記的胰島素(抗原)和定時的抗胰島素抗體混合,經一定作用時間后,分離收集抗原抗體復合物及游離的抗原,測定這兩部分的放射活性,計算結合率。在反應系統中,待檢標本的胰島素抗原與同位素標記的胰島素
放射免疫分析的常用方法
(1)液相法:將待檢標本(例如含胰島素抗原)與定時的同位素標記的胰島素(抗原)和定時的抗胰島素抗體混合,經一定作用時間后,分離收集抗原抗體復合物及游離的抗原,測定這兩部分的放射活性,計算結合率。醫學/教育網搜集整理在反應系統中,待檢標本的胰島素抗原與同位素標記的胰島素競爭奪戰 性與胰島素抗體
免疫細胞化學常用試劑介紹
一、固定劑 大多數神經激素、肽類物質為水溶性,在用于免疫細胞化學研究之前,常需固定。但肽類和蛋白質的物理、化學性質不同,因而對不同的固定方法或固定劑的反應也不盡相同。某些固定劑甚至可同時破壞和/或保護同一抗原的不同抗原決定簇。因此,在進行免疫細胞化學研究之前,很有必要了解所要研究的物質(蛋白質或肽
免疫細胞化學常用試劑介紹
一、固定劑 大多數神經激素、肽類物質為水溶性,在用于免疫細胞化學研究之前,常需固定。但肽類和蛋白質的物理、化學性質不同,因而對不同的固定方法或固定劑的反應也不盡相同。某些固定劑甚至可同時破壞和/或保護同一抗原的不同抗原決定簇。因此,在進行免疫細胞化學研究之前,很有必要了解所要研究的物質(蛋白質或肽
原子吸收分析中石墨管的選擇及型號參考
當今的分析師期望他們的石墨爐原子吸收光譜儀能表現出異乎尋常的分析性能。其在靈敏度(特征性質量)、準確度和精確度方面的性能必須是可重現的。作為石墨爐的核心,石墨管在使某項分析達到總體穩定性方面扮演著至關重要的角色。為了確保分析條件在不同原子化周期或不同石墨管之間保持穩定,所有石墨部件——接觸柱、石墨管
分析放射免疫常用的方法有哪些
放射免疫分析常用的有液相法和固相法兩種:(1)液相法:將待檢標本(例如含胰島素抗原)與定時的同位素標記的胰島素(抗原)和定時的抗胰島素抗體混合,經一定作用時間后,分離收集抗原抗體復合物及游離的抗原,測定這兩部分的放射活性,計算結合率。在反應系統中,待檢標本的胰島素抗原與同位素標記的胰島素競爭奪戰 性
放射免疫分析常用方法包括哪些?
放射免疫分析常用的有液相法和固相法兩種: (1)液相法:將待檢標本(例如含胰島素抗原)與定時的同位素標記的胰島素(抗原)和定時的抗胰島素抗體混合,經一定作用時間后,分離收集抗原抗體復合物及游離的抗原,測定這兩部分的放射活性,計算結合率。在反應系統中,待檢標本的胰島素抗原與同位素標記的胰島素競爭
免疫組化中抗體選擇要求
免疫組化中抗體選擇要求 1、一抗選擇要點 (1)選擇單克隆還是多克隆抗體。由一種克隆產生的特異性抗體叫做單克隆抗體,單克隆抗體能目標明確地與單一特異抗原決定簇結合,就象導彈精確地命中目標一樣。另一方面,即使是同一個抗原決定簇,在機體內也可以由好幾種克隆產生抗體,形成好幾種單克隆抗
免疫組化中抗體選擇要求
1、一抗選擇要點 (1)選擇單克隆還是多克隆抗體。由一種克隆產生的特異性抗體叫做單克隆抗體,單克隆抗體能目標明確地與單一特異抗原決定簇結合,就象導彈精確地命中目標一樣。另一方面,即使是同一個抗原決定簇,在機體內也可以由好幾種克隆產生抗體,形成好幾種單克隆抗體混雜物,稱為多克隆抗體。在抗原抗體反應中,
免疫組化中抗體選擇要求
免疫組化中抗體選擇要求 1、一抗選擇要點 (1)選擇單克隆還是多克隆抗體。由一種克隆產生的特異性抗體叫做單克隆抗體,單克隆抗體能目標明確地與單一特異抗原決定簇結合,就象導彈精確地命中目標一樣。另一方面,即使是同一個抗原決定簇,在機體內也可以由好幾種克隆產生抗體,形成好幾種單克隆抗
免疫細胞化學常用試劑介紹2
三、顯色液 免疫細胞化學中,由于抗原-抗體反應所形成的復合物本身無色,無法直接觀察,因而需借助于某些化學基團的呈色作用,使其得以顯示,以利于在顯微鏡下觀察。常用的顯色液有: 1.DAB(Diaminobenzidine)顯色液 DAB即3,3-二氨基苯聯胺 試劑:DAB(常用四鹽酸鹽) 50
電泳分析常用方法介紹
(一)醋酸纖維素薄膜電泳醋酸纖維素是提纖維素的羥基乙酰化形成的纖維素醋酸酯。由該物質制成的薄膜稱為醋酸纖維素薄膜。這種薄膜對蛋白質樣品吸附性小,幾乎能完全消除紙電泳中出現的“拖尾”現象,又因為膜的親水性比較小,它所容納的緩沖液也少,電泳時電流的大部分由樣品傳導,所以分離速度快,電泳時間短,樣品用量少
實驗分析方法常用固定相基質特征及常用種類
一、固定相基質的特征由于HPLC分離過程涉及物理化學作用、流體動力カ學、熱力學過程等,因而對固定相基質材料的物理化學性質有比較嚴格的要求。液相色譜固定相基質可分為無機氧化物、有機聚合物和無機有機雜化材料三種類型。雜化基質作為一類新型液相色譜固定相基質,近兩年發展較快,但大多尚處于研究階段。無機和有機
人工被動免疫的常用生物制品介紹
人工被動免疫的常用生物制品有抗毒素、胎盤球蛋白、抗菌血清、免疫調節劑等。抗毒素抗毒素是用從致病微生物獲得的類毒素多次接種實驗動物(常用的是馬),待這些動物產生大量對抗該類毒素的抗體后,把動物的血作為原料,從血清中提取出抗體,這種抗體叫做抗毒素。白喉抗毒素、破傷風和肉毒抗毒素就是這樣的生物制品。目前我
常用的免疫熒光素的特點介紹
常用的標記物有熒光素、酶、放射性核素及膠體金等。免疫標記技術具有快速、定性或定量甚至定位的特點,是應用最廣泛的免疫學檢測技術。常用的免疫熒光素主要有:1 .異硫氰酸熒光素?(FITC) ,最大吸收光譜為 490~495nm ,最大發射光譜為 520~530nm ,呈黃綠色熒光。2 .四乙基羅丹明?(
人工被動免疫的常用生物制品介紹
人工被動免疫的常用生物制品有抗毒素、胎盤球蛋白、抗菌血清、免疫調節劑等。
常用的免疫抑制劑介紹
常用的免疫抑制劑主要有五類:(1)糖皮質激素類,如可的松和強的松;(2)微生物代謝產物,如環孢菌素和藤霉素等;(3)抗代謝物,如硫唑嘌呤和6-巰基嘌呤等;(4)多克隆和單克隆抗淋巴細胞抗體,如抗淋巴細胞球蛋白和OKT3等;(5)烷化劑類,如環磷酰胺等。
常用被動免疫的生物制品功能介紹
人工被動免疫的常用生物制品有抗毒素、胎盤球蛋白、抗菌血清、免疫調節劑等。抗毒素抗毒素是用從致病微生物獲得的類毒素多次接種實驗動物(常用的是馬),待這些動物產生大量對抗該類毒素的抗體后,把動物的血作為原料,從血清中提取出抗體,這種抗體叫做抗毒素。白喉抗毒素、破傷風和肉毒抗毒素就是這樣的生物制品。目前我
常用的免疫抑制劑介紹
(1)糖皮質激素類,如可的松和強的松、潑尼松龍等;(2)微生物代謝產物,如環孢菌素和藤霉素等;(3)抗代謝物,如硫唑嘌呤和6-巰基嘌呤等;(4)多克隆和單克隆抗淋巴細胞抗體,如抗淋巴細胞球蛋白和OKT3等;(5)烷化劑類,如環磷酰胺等。
常用的免疫組化技術方法介紹
根據生物技術實驗總結我們知道,免疫組化技術就是用標記的特異性抗體對組織切片或細胞標本中某些化學成分的分布和含量進行組織和細胞原位定性、定位或定量研究,其又稱之為免疫細胞化學技術。下面簡單介紹幾種常用的免疫組化技術方法,希望能夠加深大家對免疫組化技術的了解。 目前常用的幾種免疫組化技術w
免疫標記技術常用的標記物介紹
常用的標記物有熒光素、酶、放射性核素及膠體金等。免疫標記技術具有快速、定性或定量甚至定位的特點,是應用最廣泛的免疫學檢測技術。 常用的免疫熒光素主要有: 1 .異硫氰酸熒光素 (FITC) ,最大吸收光譜為 490~495nm ,最大發射光譜為 520~530nm ,呈黃綠色熒光。 2 .
常用的熒光分析方法及儀器
直接測定法利用物質自身發射的熒光進行測定分析。間接測定法不管是直接測定,還是間接測定,一般的采用標準工作曲線法,取各種已知量的熒光物質,配成一系列的標準溶液,測定出這些標準溶液的熒光強度,然后給出熒光強度對標準溶液的濃度的工作曲線。在同樣的儀器條件下,測定未知樣品的熒光強度,然后從標準工作曲線上查出
常用免疫檢驗方法的影響因素及評價
1、免疫濁度法(免疫透射比濁法、免疫散射比濁法):(1)帶現象(由于抗原或抗體極度過剩,而無沉淀物形成。如抗體過量稱為前帶現象,如抗原過量稱為后帶現象)可使結果偏低,甚至假陰性結果;(2)血脂過高,可使結果假性偏高。2、ELISA:(1)鉤狀效應(類似于后帶現象,出現于雙位點一步法中,當待測抗原濃度