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  • 多酚氧化酶(PPO)的分離提取

    一、原理與目的多酚氧化酶是植物組織內廣泛存在的一種含銅氧化酶,植物受到機械損傷和病菌侵染后,PPO催化酚與O2氧化形成醌,是組織形成褐變,以便損傷恢復,防止或減少感染,提高抗病能力。醌類物質對微生物有毒害作用,所以傷口醌類物質出現是植物防止傷口感染的愈傷反應,因而受傷組織一般這種酶的活性就會提高。多酚氧化酶也可與細胞內其他底物氧化相偶聯,起到末端氧化酶的作用。PPO的存在是水果、蔬菜褐變及營養喪失的主要原因之一。PPO氧化內源的酚類物質生成鄰醌,鄰醌再相互聚合成醌或蛋白質、氨基酸等作用生成高分子絡合物而導致褐色素的生成,色素分子量愈高,顏色愈暗。多酚氧化酶活性高低也是馬鈴薯解除休眠的指標之一。本實驗將采用馬鈴薯為主要材料,通過組織細胞破碎勻漿、過濾、離心、硫酸銨沉淀、透析等步驟獲得PPO的粗酶液。通過本項實驗,學習和了解蛋白質的提取、分離的基本原理和方法,掌握相關儀器設備的操作使用,以及蛋白質的提取、分離的系統技術。二、材料與試......閱讀全文

    多酚氧化酶(PPO)的分離提取

    一、原理與目的多酚氧化酶是植物組織內廣泛存在的一種含銅氧化酶,植物受到機械損傷和病菌侵染后,PPO催化酚與O2氧化形成醌,是組織形成褐變,以便損傷恢復,防止或減少感染,提高抗病能力。醌類物質對微生物有毒害作用,所以傷口醌類物質出現是植物防止傷口感染的愈傷反應,因而受傷組織一般這種酶的活性就會提高。多

    多酚氧化酶的提取、純化和活力測定

    實驗概要本文介紹了多酚氧化酶提取、純化和活力測定的原理及方法等。實驗原理很多植物受到機械損傷時在空氣中會逐漸變成褐色,這是損傷時植物細胞破碎,原來彼此分開的多酚氧化酶和多酚類物質接觸反應的結果。反應如下:+H2O多酚氧化酶+1/2O2多酚氧化酶(po1yphenoloxidase,PP0)是一種含銅

    多酚氧化酶的提取、純化和活力測定

    實驗概要本文介紹了多酚氧化酶提取、純化和活力測定的原理及方法等。實驗原理很多植物受到機械損傷時在空氣中會逐漸變成褐色,這是損傷時植物細胞破碎,原來彼此分開的多酚氧化酶和多酚類物質接觸反應的結果。反應如下:+H2O多酚氧化酶+1/2O2多酚氧化酶(po1yphenoloxidase,PP0)是一種含銅

    多酚氧化酶的研究歷史

    多酚氧化酶(,PPO)是自然界中分布極廣的一種金屬蛋白酶,普遍存在于植物、真菌、昆蟲的質體中,甚至在土壤中腐爛的植物殘渣上都可以檢測到多酚氧化酶的活性。由于其檢測方便,是被最早研究的幾類酶之一。自1883年Yoghid發現日本漆樹液汁變硬可能和某種活性物質相關,1938年Keilin D.和Mann

    多酚氧化酶的制備方法

    由絲狀菌(Alternaria; Asp. niger; Corio-lus)或擔子菌(Cyathus; Polyporus cinereus; Pycno porus coc-cineus; Polyporus; Trametes) 的培養液,用室溫以下的水提取后,再在低溫下用冷的乙醇、含水乙醇或

    多酚氧化酶的制備方法

    由絲狀菌(Alternaria; Asp. niger; Corio-lus)或擔子菌(Cyathus; Polyporus cinereus; Pycno porus coc-cineus; Polyporus; Trametes) 的培養液,用室溫以下的水提取后,再在低溫下用冷的乙醇、含水乙醇或

    多酚氧化酶的檢測方法

    活性測定常用檢壓法和分光光度法。前者應用多酚氧化酶(PPO)可催化兒茶素等底物在有氧條件下的氧化還原反應,根據底物的氧化速率與單位酶濃度和單位時間內的耗氧量成正比這一原理,用瓦氏呼吸儀測定反應過程中的耗氧量求得PPO活性的大小,此方法設備簡便,但操作復雜,誤差較大。后者利用鄰苯二酚和D-兒茶素在PP

    多酚氧化酶的研究方向

    PPO與抗病性的關系人們已進行了廣泛的研究[32]。植物在抵御病原微生物的侵染過程中,抗性相關酶發揮了重要作用,這主要包括了酚類代謝系統中的一些酶和病原相關蛋白家族PPO通過催化木質素及醌類化合物形成,構成保護性屏蔽而使細胞免受病菌的侵害,也可以通過形成醌類物質直接發揮抗病作用。目前已比較成功的有:

    關于多酚氧化酶的簡介

      多酚氧化酶是一類含銅的氧化還原酶。編號:EC 1.10.3.1(編號:EC 1.14.18.1)。催化鄰苯二酚氧化成鄰苯二醌,也能作用于單酚單加氧酶的底物。淡黃至暗褐色粉末或液體。溶于水,不溶于乙醇。有吸濕性。相對分子質量約為125000,最適pH為6.5,最適溫度為2℃。  多酚氧化酶是種末端

    多酚氧化酶的基本信息

    多酚氧化酶是一類含銅的氧化還原酶??。編號:EC 1.10.3.1?[1]??(編號:EC 1.14.18.1??)。催化鄰苯二酚氧化成鄰苯二醌,也能作用于單酚單加氧酶的底物??。淡黃至暗褐色粉末或液體。溶于水,不溶于乙醇。有吸濕性。相對分子質量約為125000,最適pH為6.5,最適溫度為2℃。多

    多酚氧化酶的基本信息

    多酚氧化酶是一類含銅的氧化還原酶? 。編號:EC 1.10.3.1 (編號:EC 1.14.18.1? )。催化鄰苯二酚氧化成鄰苯二醌,也能作用于單酚單加氧酶的底物? 。淡黃至暗褐色粉末或液體。溶于水,不溶于乙醇。有吸濕性。相對分子質量約為125000,最適pH為6.5,最適溫度為2℃? 。多酚氧化

    多酚氧化酶的理化性質

    酶蛋白具有一般蛋白質的特性,在高溫或低溫條件下有易變性失活的特點。各類酶均有其活性的最適溫度范圍,一般在30C~50℃范圍內酶活性最強。酶若失活、變性,則就喪失了催化能力。酶的催化作用具有專一性,如多酚氧化酶,只能使茶多酚物質氧化,聚合成茶多酚的氧化產物茶黃素、茶紅素和茶褐素等;蛋白酶只能促使蛋白質

    多酚氧化酶的理化性質

    酶蛋白具有一般蛋白質的特性,在高溫或低溫條件下有易變性失活的特點。各類酶均有其活性的最適溫度范圍,一般在30C~50℃范圍內酶活性最強。酶若失活、變性,則就喪失了催化能力。酶的催化作用具有專一性,如多酚氧化酶,只能使茶多酚物質氧化,聚合成茶多酚的氧化產物茶黃素、茶紅素和茶褐素等;蛋白酶只能促使蛋白質

    多酚氧化酶的檢測方法介紹

      常用檢壓法和分光光度法。前者應用多酚氧化酶(PPO)可催化兒茶素等底物在有氧條件下的氧化還原反應,根據底物的氧化速率與單位酶濃度和單位時間內的耗氧量成正比這一原理,用瓦氏呼吸儀測定反應過程中的耗氧量求得PPO活性的大小,此方法設備簡便,但操作復雜,誤差較大。后者利用鄰苯二酚和D-兒茶素在PPO催

    多酚氧化酶的研究歷史簡介

      多酚氧化酶(,PPO)是自然界中分布極廣的一種金屬蛋白酶,普遍存在于植物、真菌、昆蟲的質體中,甚至在土壤中腐爛的植物殘渣上都可以檢測到多酚氧化酶的活性。由于其檢測方便,是被最早研究的幾類酶之一。自1883年Yoghid發現日本漆樹液汁變硬可能和某種活性物質相關,1938年Keilin D.和Ma

    多酚氧化酶的活性測定方法

    常用檢壓法和分光光度法。前者應用多酚氧化酶(PPO)可催化兒茶素等底物在有氧條件下的氧化還原反應,根據底物的氧化速率與單位酶濃度和單位時間內的耗氧量成正比這一原理,用瓦氏呼吸儀測定反應過程中的耗氧量求得PPO活性的大小,此方法設備簡便,但操作復雜,誤差較大。后者利用鄰苯二酚和D-兒茶素在PPO催化下

    植物中的多酚氧化酶及作用

      在植物(如蘋果、荔枝、菠菜、馬鈴薯、豆類、茶葉、桑葉、煙草等)組織中,PPO是與內囊體膜結合在一起的,天然狀態無活性,但將組織勻漿或損傷后PPO被活化,從而表現出活性。在果蔬細胞組織中,PPO存在的位置因原料的種類、品種及成熟度的不同而有差異,綠葉中PPO活性大部分存在于葉綠體內[7];馬鈴薯塊

    多酚氧化酶的理化性質介紹

      酶蛋白具有一般蛋白質的特性,在高溫或低溫條件下有易變性失活的特點。各類酶均有其活性的最適溫度范圍,一般在30C~50℃范圍內酶活性最強。酶若失活、變性,則就喪失了催化能力。酶的催化作用具有專一性,如多酚氧化酶,只能使茶多酚物質氧化,聚合成茶多酚的氧化產物茶黃素、茶紅素和茶褐素等;蛋白酶只能促使蛋

    植物中的多酚氧化酶及作用

    在植物(如蘋果、荔枝、菠菜、馬鈴薯、豆類、茶葉、桑葉、煙草等)組織中,PPO是與內囊體膜結合在一起的,天然狀態無活性,但將組織勻漿或損傷后PPO被活化,從而表現出活性。在果蔬細胞組織中,PPO存在的位置因原料的種類、品種及成熟度的不同而有差異,綠葉中PPO活性大部分存在于葉綠體內[7];馬鈴薯塊莖中

    植物中的多酚氧化酶及作用

    在植物(如蘋果、荔枝、菠菜、馬鈴薯、豆類、茶葉、桑葉、煙草等)組織中,PPO是與內囊體膜結合在一起的,天然狀態無活性,但將組織勻漿或損傷后PPO被活化,從而表現出活性。在果蔬細胞組織中,PPO存在的位置因原料的種類、品種及成熟度的不同而有差異,綠葉中PPO活性大部分存在于葉綠體內;馬鈴薯塊莖中幾乎所

    多酚氧化酶的純化和活力測定

    實驗原理很多植物受到機械損傷時在空氣中會逐漸變成褐色,這是損傷時植物細胞破碎,原來彼此分開的多酚氧化酶和多酚類物質接觸反應的結果。反應如下: +H2O 多酚氧化酶 +1/2O2 多酚氧化酶(po1yphenoloxidase,PP0)是一種含銅酶,它能夠催化酚類物質轉變成

    多糖多酚植物RNA提取的利器

    眾多文獻報道,許多植物由于未能有效地分離純化出其組織中的RNA, 而阻礙了其分子生物學方面的研究進展。比如Northern雜交分析,體外翻譯分析或建cDNA文庫,RT-PCR及差異顯示分析等研究,都需要高質量的RNA。因此,提取純度高、完整性好的RNA是順利進行上述研究的關鍵所在。RNA提取的常見難

    多酚氧化酶活性的測定(氧電極法)

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    PPO活性測定——分光光度法

    PPO活性測定可應用于:(1)研究PPO生理機制與調節。(2)了解酶的活性與植物組織褐變以及生理活動之間的關系。實驗方法原理PPO催化各種酚與O2氧化為醌。本實驗是采用鄰苯二酚為底物,在0.2M磷酸氫二鈉-0.1M檸檬酸緩沖液PH5.8的反應體系中,PPO催化鄰苯二酚形成褐色的醌,在分光光度計410

    PPO活性測定

    分光光度法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 PPO催化各種酚與O2氧化為醌。本實驗是采用鄰苯二酚為底物,在0.2M磷酸氫二鈉-0.1M檸檬酸緩沖液PH5.8的反應體系中,PPO

    多糖多酚植物RNA快速提取的方法

    操作步驟:提示:(1) 第一次使用前請先在漂洗液RW瓶加入指定量無水乙醇!(2) 操作前在裂解液RLT中加入β-巰基乙醇至終濃度1%,如1 ml RLT 中加入10μl β-巰基乙醇。此裂解液最好現用現配。配好的RLT 4℃可放置一個月。1. 直接研磨法(推薦):a.? 新鮮植物組織稱重后取100m

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    單寧是水溶性多酚類物質。主要存在于高粱和豆科子實中。據報道,單寧與胰蛋白酶和淀粉酶或酶的底物反應,降低蛋白質和碳水化合物的利用率。單寧也可以與金屬離子等化合物形成沉淀,還可以與維生素B12形成絡合物而降低其利用率。  單寧及棉酚是阻礙高粱和棉粕(餅)大量使用的主要因素。現在多用微生物發酵法去除單寧和

    植物PPO的研究現狀及展望

      PPO與抗病性的關系人們已進行了廣泛的研究[32]。植物在抵御病原微生物的侵染過程中,抗性相關酶發揮了重要作用,這主要包括了酚類代謝系統中的一些酶和病原相關蛋白家族PPO通過催化木質素及醌類化合物形成,構成保護性屏蔽而使細胞免受病菌的侵害,也可以通過形成醌類物質直接發揮抗病作用。目前已比較成功的

    面粉白度測定儀對于鮮切面面粉白度的分析

    ????? 理想的鮮切面色澤應是細膩潔白或呈奶油黃色,光潔度高,灰暗、無光澤是不受人們喜愛的。在對鮮切面色澤性狀的進行選擇時,應注意篩選面粉白度高、光澤度好、蛋白質和灰分含量低、支鏈淀粉含量高的品種,或面粉黃度高的品種。面粉的白度可以通過面粉白度測定儀進行檢測,從而更好的生產鮮切面。????? 多酚

    植物體內多酚氧化酶活性的測定實驗

    實驗方法原理多酚氧化酶是一種含銅的氧化酶,在有氧的條件下,能使一元酚和二元酚氧化產生醌。用分光光度法在525nm波長下測其吸光度,即可計算出多酚氧化酶的活力和比活性。反應式如下:. ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?實驗材料馬鈴薯塊莖 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?

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