培養細胞單細胞懸液的制備
實驗材料胰蛋白酶細胞試劑、試劑盒EDTA·2NaPBS儀器、耗材離心管實驗步驟一、培養細胞的特征一般細胞培養分為懸浮培養和貼壁培養,由于細胞的增殖有可能形成大小不等的細胞團塊或連接成片。如果兩個或多個細胞粘連在一塊或細胞碎片過多都將影響 FCM 結果,進而導致實驗失敗。所以,制備合格的培養細胞單細胞懸液十分重要。二、培養細胞樣品的制備程序1. 將培養細胞用 0.04% 乙二胺四乙酸二鈉鹽(EDTA·2Na)或 0.29% 胰蛋白酶消化 3~7 min(根據室溫情況而定),至光鏡下見到貼壁細胞間出現篩狀間隙為止,棄去消化液,加 PBS 液。2. 用吸管將細胞從瓶壁上輕輕吹打下來,并移入離心管中。3. 短時低速離心,即 800~1000 r/min,5 min。4. 棄上清,加 pH 7.4 的 PBS 液 5~8 ml,低速短時離心,800~1000 r/min 離心 3~5 min;重復 2~3 次,以去除細胞懸液中的細胞碎片。......閱讀全文
培養細胞單細胞懸液的制備
實驗材料胰蛋白酶細胞試劑、試劑盒EDTA·2NaPBS儀器、耗材離心管實驗步驟一、培養細胞的特征一般細胞培養分為懸浮培養和貼壁培養,由于細胞的增殖有可能形成大小不等的細胞團塊或連接成片。如果兩個或多個細胞粘連在一塊或細胞碎片過多都將影響 FCM 結果,進而導致實驗失敗。所以,制備合格的培養細胞單細胞
培養細胞單細胞懸液的制備
? ? ? ? ? ? 實驗材料 胰蛋白酶 細胞 試劑、試劑盒 EDTA·2Na PBS
培養細胞單細胞懸液的制備
實驗材料 胰蛋白酶細胞試劑、試劑盒 EDTA·2NaPBS儀器、耗材 離心管實驗步驟 一、培養細胞的特征一般細胞培養分為懸浮培養和貼壁培養,由于細胞的增殖有可能形成大小不等的細胞團塊或連接成片。如果兩個或多個細胞粘連在一塊或細胞碎片過多都將影響 FCM 結果,進而導致實驗失敗。所以,制備合格的培養細
培養細胞單細胞懸液的制備
? ? ? ? ? ? 實驗材料 胰蛋白酶 細胞 試劑、試劑盒 EDTA·2Na PBS
脫落細胞單細胞懸液的制備
實驗方法原理 在臨床工作中,可以收集到大量自然脫落細胞,這些細胞標本經過簡單處理,便可成為較好的單細胞懸液供流式細胞術分析。主要包括脫落細胞、胸腹水細胞、尿液、內鏡刷檢細胞等。實驗材料 細胞試劑、試劑盒 PBS儀器、耗材 尼龍濾網實驗步驟 1. 將食管拉網器上的細胞洗脫到 20 ml PBS 液中,
脫落細胞單細胞懸液的制備
食管拉網細胞的單細胞懸液的制備 尿液脫落細胞的單細胞懸液的制備 胸、腹水脫落細胞的制備 沖洗液細胞樣品的制備 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 在臨
脫落細胞單細胞懸液的制備
食管拉網細胞的單細胞懸液的制備 尿液脫落細胞的單細胞懸液的制備 胸、腹水脫落細胞的制備 沖洗液細胞樣品的制備 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 在臨
單細胞懸液制備方法介紹
01取樣→預處理 取樣是原代單細胞懸液制備非常重要的一步,其質量會直接影響到后續處理效果。 操作時,首先根據不同實驗需求麻醉或處死動物后進行消毒、固定并切開相應位置皮膚暴露目的組織。 其次操作過程中有以下幾點也需要注意: 嚴格無菌操作,快速處理; 針對不同組織類型控制環境溫度; 保證
骨髓細胞單細胞懸液的制備
? ? ? ? ? ? 實驗材料 骨髓液 試劑、試劑盒 肝素抗凝劑 PBS 實驗步驟
骨髓細胞單細胞懸液的制備
? ? ? ? ? ? 實驗材料 骨髓液 試劑、試劑盒 肝素抗凝劑 PBS 實驗步驟
骨髓細胞單細胞懸液的制備
實驗材料骨髓液試劑、試劑盒肝素抗凝劑PBS實驗步驟1. 無菌抽取骨髓液 0.5 ml。2. 將骨髓標本滴入含 1000 U/ml 肝素抗凝劑的 1 ml PBS 液中。3. 再加入 PBS 液稀釋至 10 mI。4. 用吸管吸取 5 ml 稀釋骨髓液徐徐加入盛有 4 ml 的人類淋巴細胞分離液液面之
GentleMACS/單細胞懸液制備文獻集錦
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脾臟組織單細胞懸液的制備方法
1.?剪碎法:將組織塊放入平皿后,加入少量F液及20%胎牛血清;用眼科剪將組織剪至勻漿狀,加入5mlF液及20%胎牛血清;用吸管吸取組織勻漿,用100目不銹鋼濾網(另購)過濾到試管內;離心沉淀1500轉/分×3 min,再用細胞洗滌液清洗3次,每次以500rpm短時低速離心除去細胞碎片,以200目不
脫落細胞單細胞懸液的制備——食管拉網細胞
實驗方法原理在臨床工作中,可以收集到大量自然脫落細胞,這些細胞標本經過簡單處理,便可成為較好的單細胞懸液供流式細胞術分析。主要包括脫落細胞、胸腹水細胞、尿液、內鏡刷檢細胞等。實驗材料細胞試劑、試劑盒PBS儀器、耗材尼龍濾網實驗步驟1. 將食管拉網器上的細胞洗脫到 20 ml PBS 液中,以 150
脫落細胞單細胞懸液的制備——尿液脫落細胞
實驗方法原理在臨床工作中,可以收集到大量自然脫落細胞,這些細胞標本經過簡單處理,便可成為較好的單細胞懸液供流式細胞術分析。主要包括脫落細胞、胸腹水細胞、尿液、內鏡刷檢細胞等。實驗材料尿液試劑、試劑盒生理鹽水儀器、耗材尼龍網實驗步驟1. 用一清潔器皿收集 24 h 尿液,置 4℃ 冰箱中自然沉淀 2
如何制備新鮮實體組織單細胞懸液
流式細胞術對細胞的各種參數分析必須基于單細胞的基礎上,根據不同實體組織成分的特點可選擇不同的分散細胞的方 法,以期達到單細胞產量高、細胞損傷小的目的。在實體組織分散為單細胞的過程中,解離的方法有可能瞬間或持久地影響細胞的性質,比如,形態上顯而易見的細 胞膜破損,細胞表面上可出現泡狀特征,還有一些是難
脫落細胞單細胞懸液的制備——沖洗液細胞樣品的制備
實驗方法原理在臨床工作中,可以收集到大量自然脫落細胞,這些細胞標本經過簡單處理,便可成為較好的單細胞懸液供流式細胞術分析。主要包括脫落細胞、胸腹水細胞、尿液、內鏡刷檢細胞等。實驗材料膀胱試劑、試劑盒生理鹽水PBS儀器、耗材尼龍網實驗步驟1. 用 300~500 ml 生理鹽水沖洗膀胱,沖洗一定時間后
脫落細胞單細胞懸液的制備——胸、腹水脫落細胞的制備
實驗方法原理在臨床工作中,可以收集到大量自然脫落細胞,這些細胞標本經過簡單處理,便可成為較好的單細胞懸液供流式細胞術分析。主要包括脫落細胞、胸腹水細胞、尿液、內鏡刷檢細胞等。實驗材料胸、腹水試劑、試劑盒肝素液PBS儀器、耗材尼龍網實驗步驟1. 抽取胸、腹水 50~100 ml,加入 1000 U/m
組織活檢、內鏡取材標本單細胞懸液的制備
實驗材料組織試劑、試劑盒PBS儀器、耗材剪刀尼龍網實驗步驟1. 取材后立即放入盛少許 PBS 液的青霉素小瓶中。2. 另取一只小燒杯,杯口用 300 目尼龍網蓋住,用線繩固定好,并用 PBS 液濕潤,取新鮮組織標本置尼龍網上;因標本量較少,尤其是內鏡取材至少要取 3 塊以上。3. 在操作前,先將剪刀
組織活檢、內鏡取材標本單細胞懸液的制備
實驗材料 組織試劑、試劑盒 PBS儀器、耗材 剪刀尼龍網實驗步驟 1. 取材后立即放入盛少許 PBS 液的青霉素小瓶中。2. 另取一只小燒杯,杯口用 300 目尼龍網蓋住,用線繩固定好,并用 PBS 液濕潤,取新鮮組織標本置尼龍網上;因標本量較少,尤其是內鏡取材至少要取 3 塊以上。3. 在操作前,
單細胞懸液儀主要優點
細胞學與分子生物學研究通常會將組織分散,制作單細胞懸液。傳統的單細胞懸液制備方法有機械法、酶消化法以及兩者的組合等,這些方法需要繁瑣的操作過程,費時費力。我們的單細胞懸液儀將會使單細胞懸液制備變得快速、簡單。 單細胞懸液儀主要優點 ? 通量高,一次最多64個樣本; ? 速度快,
流式細胞術實驗單細胞懸液的獲取
單細胞懸液的獲取:外周血和骨髓穿刺液為天然單細胞懸液;活檢組織常用機械分離和酶消化兩種方法。不同的實驗要求適用不同的方法。對于需要進行膜抗原標記的,不僅是要獲得足夠的單細胞懸液,還要盡量保證細胞結構的完整性和抗原性,機械法較適用。只需進行細胞周期或DNA倍體分析的,在機械法的基礎上加酶消化(如胰
脾臟單個核細胞懸液如何制備
(1)大鼠斷頸處死后,無菌取脾置于消毒平皿中稱重;(2)超凈工作臺上置10cm直徑無菌平皿,加入5~10ml D-hanks平衡液 ,置一80目的不銹鋼篩于平皿中,脾臟置于篩網中,用剪刀剪碎脾,用5ml玻璃注射器針芯輕輕捻磨脾臟,使分散的細胞濾過金屬網進入平皿的液體中, D-hanks沖洗一次;(3
鹽水配血法—紅細胞懸液和血清的制備方法
鹽水配血法—紅細胞懸液和血清的制備方法:靜脈采血3ml,取下針頭,將其中的0.4ml注入已加入106mmol/L枸櫞酸鈉抗凝劑0.1ml的試管中(血液與抗凝劑的比例為4:1),混勻,待用。剩余血液加入另一支試管中,使其自然凝固。分離血清備用。洗滌紅細胞:取抗凝血一份,加8-10倍量的生理鹽水,顛
ES細胞分化培養實驗——懸滴培養
實驗材料未分化 ES 細胞試劑、試劑盒PBS儀器、耗材ES 分化培養基移液器實驗步驟1. 準備下列試劑和材料:未分化 ES 細胞無 Ca2+?和 Mg2+?PBSES 分化培養基8 道微量移液器無菌多道移液器容器2. 收獲未分化 ES 細胞。3. 在 100 mm 組織培養皿中加 10 ml PBS
一定濃度菌懸液的制備
園友Gloria1983,lphare推薦麥氏比濁法。園友loveswh2006 提供的微生物實驗指導(黃文芳,張松編著,華南師范大學生命科學學院)在實驗15微生物數量的測定中有詳細的操作介紹。微生物數量的測定細菌群體生長表現為細胞數目的增加或細胞物質的增加。測定細胞數目的方法有顯微鏡直接計數法(d
單細胞培養培養方法介紹細胞懸浮培養法
用液體培養基對保持良好的分散狀態的單個細胞或小的細胞聚集體于搖床上進行培養的方法,稱為細胞懸浮培養法(cell suspension culture)。依據培養目的不同,可分為淺層培養和深層培養。淺層培養是指使培養材料的一部分裸露于液體培養基表面,采用靜止培養的方式,適用于各種器官和組織的培養。深層
特殊細胞培養實驗_單細胞分離培養法
實驗方法原理從理論上說各種培養細胞都可用以進行克隆培養。但實際上,初代培養細胞和有限細胞系(二倍體細胞)比較困難。無限細胞系、轉化細胞系和腫瘤細胞等則比較容易。其原因是,當體內任何細胞被置于體外培養后,對培養環境都有一個適應過程。期間細胞對營養液具有同化作用,即從培養液中攝取營養的同時,也向培養液排
單細胞培養的基本介紹
單細胞培養(single cell culture)是指從植物器官、愈傷組織或懸浮培養物中游離出單個細胞,在無菌條件下,進行體外生長、發育的技術。人們分離和培養植物單細胞的設想和實踐都比較早,但成功地進行單細胞培養是隨著更有效的培養基的發展以及從愈傷組織懸浮培養物分離單細胞的專門技術的建立才實現
單細胞培養技術的概念
單細胞培養(single cell culture)是指從植物器官、愈傷組織或懸浮培養物中游離出單個細胞,在無菌條件下,進行體外生長、發育的技術。人們分離和培養植物單細胞的設想和實踐都比較早,但成功地進行單細胞培養是隨著更有效的培養基的發展以及從愈傷組織懸浮培養物分離單細胞的專門技術的建立才實現的。