脂質體2000使用說明書及特點
注意事項 ?推薦在混合前使用Opti-MEM I低血清培養基(Cat. No. 31985-062)稀釋 Lipofectamine 2000和核酸。 ?轉染過程中勿向培養基中添加抗生素,以免造成細胞死亡。 ?不同批實驗請保持細胞接種條件相同。 ?請檢測無血清培養基與Lipofectamine 2000的兼容性,因為一些無血清培養 基(如CD293, SFM II, VP-SFM等)可能抑制陽離子脂質體介導的轉染。脂質體RNAi或siRNA轉染下列步驟適用于24孔板培養的哺乳動物細胞,至于其他培養材料,請參考轉染規模調整,所有數量和體積均是按每孔計算。1. 轉染前一日,將細胞接種于500 μl不含抗生素的培養基中,使其在轉染時長 至30-50%融合。2. 轉染液制備,每孔細胞用量如下:A. 用50 μl Opti-ME I低血清培養基(或者其他無血清培養基)稀釋20 pmol siRNA(轉染時siRNA終濃度為33 nM),輕......閱讀全文
脂質體簡介
脂質體(liposome)是一種人工膜。在水中磷脂分子親水頭部插入水中,脂質體疏水尾部伸向空氣,攪動后形成雙層脂分子的球形脂質體,直徑25~1000nm不等。脂質體可用于轉基因,或制備的藥物,利用脂質體可以和細胞膜融合的特點,將藥物送入細胞內部 生物學定義:當兩性分子如磷脂和鞘脂分散于水相時,分
什么是脂質體?
脂質體(Liposomes)是由卵磷脂和神經酰胺等制得的脂質體(空心),具有的雙分子層結構與皮膚細胞膜結構相同,對皮膚有優良的保濕作用,尤其是包敷了保濕物質如透明質酸、聚葡糖苷等的脂質體是更優秀的保濕性物質。
脂質體的特點
1、靶向性和淋巴定向性:肝、脾網狀內皮系統的被動靶向性。用于肝寄生蟲病、利什曼病等單核-巨噬細胞系統疾病的防治。如肝利什曼原蟲藥銻酸葡胺脂質體,其肝中濃度比普通制劑提高了200~700倍。2、緩釋作用:緩慢釋放,延緩腎排泄和代謝,從而延長作用時間。3、降低藥物毒性:如兩性霉素B脂質體可降低心臟毒性。
脂質體的分類
脂質體的分類1.脂質體按照所包含類脂質雙分子層的層數不同,分為單室脂質體和多室脂質體。小單室脂質體(SUV):粒徑約0.02~0.08um;大單室脂質體 (LUV)為單層大泡囊,粒徑在0.1~lum。多層雙分子層的泡囊稱為多室脂質體 (MIV),粒徑在1~5um之間。2.按照結構分:單室脂質體,多室
脂質體的分類
1.脂質體按照所包含類脂質雙分子層的層數不同,分為單室脂質體和多室脂質體。 小單室脂質體(SUV):粒徑約0.02~0.08um;大單室脂質體 (LUV)為單層大泡囊,粒徑在0.1~lum。 多層雙分子層的泡囊稱為多室脂質體 (MIV),粒徑在1~5um之間。 2.按照結構分:單室脂質體,
脂質體的簡介
脂質體(liposome)是一種人工膜。在水中磷脂分子親水頭部插入水中,脂質體疏水尾部伸向空氣,攪動后形成雙層脂分子的球形脂質體,直徑25~1000nm不等。脂質體可用于轉基因,或制備的藥物,利用脂質體可以和細胞膜融合的特點,將藥物送入細胞內部 生物學定義:當兩性分子如磷脂和鞘脂分散于水相時,分
脂質體的特點
1、靶向性和淋巴定向性:肝、脾網狀內皮系統的被動靶向性。用于肝寄生蟲病、利什曼病等單核-巨噬細胞系統疾病的防治。如肝利什曼原蟲藥銻酸葡胺脂質體,其肝中濃度比普通制劑提高了200~700倍。 2、緩釋作用:緩慢釋放,延緩腎排泄和代謝,從而延長作用時間。 3、降低藥物毒性:如兩性霉素B脂質體可降
脂質體的分類
1.脂質體按照所包含類脂質雙分子層的層數不同,分為單室脂質體和多室脂質體。小單室脂質體(SUV):粒徑約0.02~0.08μm;大單室脂質體 (LUV)為單層大泡囊,粒徑在0.1~lμm。多層雙分子層的泡囊稱為多室脂質體 (MIV),粒徑在1~5μm之間。2.按照結構分:單室脂質體,多室脂質體,多囊
脂質體的分類
脂質體的分類1.脂質體按照所包含類脂質雙分子層的層數不同,分為單室脂質體和多室脂質體。小單室脂質體(SUV):粒徑約0.02~0.08um;大單室脂質體 (LUV)為單層大泡囊,粒徑在0.1~lum。多層雙分子層的泡囊稱為多室脂質體 (MIV),粒徑在1~5um之間。2.按照結構分:單室脂質體,多室
脂質體的優勢
脂質體是由脂雙分子層組成的顆粒,可介導基因穿過細胞膜。通過脂質體介導比利用病毒轉導進行基因轉移具有以下明顯的優勢:①脂質體與基因的復合過程比較容易;②易于大量生產;③脂質體是非病毒性載體,與細胞膜融合將目的基因導入細胞后,脂質即被降解,無毒,無免疫原性;④DNA或RNA可得到保護,不被滅活或被核酸酶
脂質體介導的真核細胞轉染實驗——脂質體進行穩定轉染
實驗材料哺乳動物細胞試劑、試劑盒DMEM儀器、耗材培養箱離心管實驗步驟1. ?接種細胞(見“脂質體介導短暫表達”步驟1)長至50%匯片。?2. ?制備DNA/脂質體混合物,轉染細胞(見“脂質體介導短暫表達”步驟2和3)。3. ?每孔細胞加入1 ml DMEM-20完全培養液,37℃ 培養箱培養48
靶敏感脂質體定義
靶敏感脂質體(target-sensitive liposomes, TS-liposomes)是脂質體在與靶部位結合后能自動去穩定,將內容物釋放出來。對于內吞能力比較弱或沒有內吞能力的靶細胞來說,普通的免疫脂質體通常不能有效地釋放藥物。這時,靶敏感脂質體可能更有效,釋放的藥物通過跨膜轉運進入靶
脂質體轉染的定義
脂質體是磷脂分散在水中時形成的脂質雙分子層,又稱為人工生物膜。
關于脂質體的簡介
脂質體(liposome)是一種人工膜。在水中磷脂分子親水頭部插入水中,脂質體疏水尾部伸向空氣,攪動后形成雙層脂分子的球形脂質體,直徑25~1000nm不等。脂質體可用于轉基因,或制備的藥物,利用脂質體可以和細胞膜融合的特點,將藥物送入細胞內部 生物學定義:當兩性分子如磷脂和鞘脂分散于水相時,分
脂質體轉染技術特征
陽離子脂質體表面帶正電荷,能與核酸的磷酸根通過靜電作用將DNA分子包裹入內,形成DNA一脂復合體,也能被表面帶負電荷的細胞膜吸附,再通過膜的融合或細胞的內吞作用,偶爾也通過直接滲透作用,DNA傳遞進入細胞,形成包涵體或進入溶酶體?其中一小部分DNA能從包涵體內釋放,并進入細胞質中,再進一步進入核內轉
脂質體的質量研究
粒徑 脂質體的粒徑一般為nm級,用光學顯微鏡和電子顯微鏡粗略測量其粒徑和粒徑分布。 測定包封率 測定包封率的關鍵是把未包封的游離藥物從脂質體上分離出來,常用的分離方法有柱層析法、透析法、超速離心法、超濾膜過濾法等。 滲漏率 滲漏率即為脂質體貯存期間包封率的變化情況,也就是貯存期間包封量
簡述脂質體的分類
1.脂質體按照所包含類脂質雙分子層的層數不同,分為單室脂質體和多室脂質體。 小單室脂質體(SUV):粒徑約0.02~0.08um;大單室脂質體 (LUV)為單層大泡囊,粒徑在0.1~lum。 多層雙分子層的泡囊稱為多室脂質體 (MIV),粒徑在1~5um之間。 2.按照結構分:單室脂質體,
脂質體的組成結構
脂質體的組成:類脂質(磷脂)及附加劑。1、磷脂類:包括天然磷脂和合成磷脂二類。磷脂的結構特點為一個磷酸基和一個季銨鹽基組成的親水性基團,以及由兩個較長的烴基組成的親脂性基團。 天然磷脂以卵磷脂(磷脂酰膽堿,PC)為主,來源于蛋黃和大豆,顯中性。 合成磷脂主要有DPPC(二棕櫚酰磷脂酰膽堿)、
脂質體的化學特性
(1)磷脂氧化指數:氧化指數=A233nm/A215nm;一般規定磷脂氧化指數應小于0.2。(2)磷脂量的測定:基于每個磷脂分子中僅含1個磷原子,采用化學法將樣品中磷脂轉變為無機磷后測定磷摩爾量(或重量),即可推出磷脂量。
脂質體的功能特點
1、靶向性和淋巴定向性:肝、脾網狀內皮系統的被動靶向性。用于肝寄生蟲病、利什曼病等單核-巨噬細胞系統疾病的防治。如肝利什曼原蟲藥銻酸葡胺脂質體,其肝中濃度比普通制劑提高了200~700倍。2、緩釋作用:緩慢釋放,延緩腎排泄和代謝,從而延長作用時間。3、降低藥物毒性:如兩性霉素B脂質體可降低心臟毒性。
關于脂質體的介紹
脂質體(liposome)是一種人工膜。在水中磷脂分子親水頭部插入水中,脂質體疏水尾部伸向空氣,攪動后形成雙層脂分子的球形脂質體,直徑25~1000nm不等。脂質體可用于轉基因,或制備的藥物,利用脂質體可以和細胞膜融合的特點,將藥物送入細胞內部生物學定義:當兩性分子如磷脂和鞘脂分散于水相時,分子
脂質體的制備方法
注入法、薄膜分散法、超聲波分散法、逆向蒸發法。 脂質體作為藥物載體的臨床應用 1、抗腫瘤藥物載體:阿霉素脂質體和順鉑脂質體已在國外上市。 2、抗寄生蟲藥物載體:苯硫咪唑脂質體和阿苯達唑脂質體等。利用脂質體的被動靶向性,提高藥物的生物利用度,減少用量,降低毒副作用。 3、抗菌藥物載體:慶大
脂質體的作用特點
1、靶向性和淋巴定向性:肝、脾網狀內皮系統的被動靶向性。用于肝寄生蟲病、利什曼病等單核-巨噬細胞系統疾病的防治。如肝利什曼原蟲藥銻酸葡胺脂質體,其肝中濃度比普通制劑提高了200~700倍。2、緩釋作用:緩慢釋放,延緩腎排泄和代謝,從而延長作用時間。3、降低藥物毒性:如兩性霉素B脂質體可降低心臟毒性。
脂質體有哪些特點?
1、靶向性和淋巴定向性:肝、脾網狀內皮系統的被動靶向性。用于肝寄生蟲病、利什曼病等單核-巨噬細胞系統疾病的防治。如肝利什曼原蟲藥銻酸葡胺脂質體,其肝中濃度比普通制劑提高了200~700倍。 2、緩釋作用:緩慢釋放,延緩腎排泄和代謝,從而延長作用時間。 3、降低藥物毒性:如兩性霉素B脂質體可降
脂質體的概念簡介
脂質體(liposome)是一種人工膜。在水中磷脂分子親水頭部插入水中,脂質體疏水尾部伸向空氣,攪動后形成雙層脂分子的球形脂質體,直徑25~1000nm不等。脂質體可用于轉基因,或制備的藥物,利用脂質體可以和細胞膜融合的特點,將藥物送入細胞內部生物學定義:當兩性分子如磷脂和鞘脂分散于水相時,分子的疏
脂質體擠出器的應用
薄膜擠出器是減小物料粒徑最有效的設備,同時可實現工業放大,還原實驗室研究結果。 廣泛應用于脂質體、脂肪乳、微乳、分子生物學等領域,其他任何需要勻化顆粒的。
脂質體擠出器的應用
薄膜擠出器是減小物料粒徑最有效的設備,同時可實現工業放大,還原實驗室研究結果。 廣泛應用于脂質體、脂肪乳、微乳、分子生物學等領域,其他任何需要勻化顆粒的。
脂質體擠出器的原理
通過動力端產生一定的壓力,擠壓樣品通過聚碳酸酯膜(PC濾膜)與不銹鋼微孔濾板,擠出后的樣品,其粒徑分布均勻,可達到納米級。樣品的粒徑大小與擠出壓力及PC濾膜的孔徑有關。
脂質體擠出器的選型
脂質體擠出器的選型主要考慮以下幾個方面: 1擠出樣品量 ≤1ml:采用手推式脂質體擠出器,處理范圍為0.1~1.0ml/批次 1~15ml:采用罐體、氣動式擠出器 15~100ml:采用罐體氣動式或者連續擠出方式 >100ml:一般采用連續流方式擠出 2擠出樣品工藝 脂質體擠出過程
脂質體擠出器的原理
通過動力端產生一定的壓力,擠壓樣品通過聚碳酸酯膜(PC濾膜)與不銹鋼微孔濾板,擠出后的樣品,其粒徑分布均勻,可達到納米級。樣品的粒徑大小與擠出壓力及PC濾膜的孔徑有關。