實驗方法原理 陣發性寒冷性血紅蛋白尿癥(PCH)是一種自身免疫性溶血綜合征患者體內產生一種冷反應性抗體(D-L抗體),這種抗體是一種IgG,在37℃下與紅細胞不能牢固結合,當溫度低至20℃以下時,如有補體存在D-L抗體便能結合于紅細胞表面,當溫度再增高至37℃時,由于一系列補體參與反應使紅細胞膜上形成空洞,發生溶血.
實驗材料 豚鼠
試劑、試劑盒 生理鹽水
儀器、耗材 離心機
實驗步驟
一、實驗試劑:補體制備:抽取豚鼠心臟血液2-4ml.分離其血清,保存于冰箱.臨用時以生理鹽水作1:10稀釋.
二、實驗操作:
1. 取用者及同型或O型正常人血各8ml,以玻璃珠去纖維蛋白的方法分別制備血清與紅細胞懸液或者取其中6ml應不予抗凝,分高血清.余下的2ml抗凝,以分離紅細胞.
2. 用生理鹽水洗滌紅細胞三次,最后制成50%紅細胞懸液.
3. 按表l-3-7滴加各液,經培育后離心1000r/min,5min觀察溶血現象。
三、實驗結果判斷:若第1、第2管溶血,其余管不溶血為陽性
注意事項 | 操作中第1、第2管最好在20℃以下進行操作 |
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